马力天,白 杨,林 强,苏保伟,孟宪博,王景杰*

(1空军军医大学第二附属医院消化内科,西安 710038;2解放军北部战区总医院神经外科;*通讯作者,E-mail:jingjie@fmmu.edu.cn)

慢性应激在功能性胃肠病症状的发生和发展中起重要作用。慢性避水应激模型(chronic water avoidance stress,CWAS)是Sylvie Bradesi教授在2005年首次提出,该模型会出现持久的内脏痛觉敏化(不低于1个月)、焦虑样行为、粪便颗粒数增多以及结肠免疫系统的轻度激活[1]。肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是一种慢性的功能性胃肠病。全球有9%-23%的人常被该病困扰,并寻求医治[2]。IBS的发生发展与慢性、持续、紧张的人类日常精神应激事件息息相关,且文献表明IBS患者也伴有轻度焦虑和抑郁[3,4]。这些特征与CWAS符合得很好,因此,该模型常被用于研究IBS的内脏痛觉敏化和肠道动力异常。本研究通过慢性避水应激法建立大鼠的CWAS模型,并利用OFT和AWR分别评价其焦虑样行为和内脏敏感性,之后采用转录组学测序探究其腰膨大处脊髓背角中基因表达的变化,为后续对慢性应激的研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 动物、主要仪器和试剂

SPF级健康雄性SD大鼠24只,体质量180-220 g,由空军军医大学实验动物中心提供。大鼠在实验前进行为期1周的适应性饲养,环境温度22-26 ℃,湿度40%-60%,自由饮食,光照12 h/12 h明暗交替。所有的努力都是为了减少实验动物的数量和痛苦。过量使用2%的戊巴比妥钠(40 mg/kg)安乐死动物后进行取材。本研究实验动物的使用及处置方法符合3R原则,实验开展前经过空军军医大学动物伦理委员会的批准。24只大鼠被随机分成两组:假模型组(sham组)和慢性避水应激组(CWAS组),每组12只。……