李 艳,罗栩伟,朱冬梅,杨 姣,张英娟,张 慧,陈思佳,刘 刚,刘学彬*

(1南充市中心医院,川北医学院第二临床医学院超声科,南充 637000;2南充市中心医院,川北医学院第二临床医学院骨科；*通讯作者,E-mail:540677374@qq.com)

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是世界上第三大常见癌症,目前化疗仍然是结肠癌患者的一线治疗方法,但由于耐药性的产生,结肠癌易复发转移,死亡率仍然居高不下[1,2]。研究发现[3-5]肿瘤细胞中有一小群具有干性的细胞,在肿瘤异质性的形成和获得抗药性中起关键作用,被称为肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs),是影响结肠癌耐药性获得和复发转移过程的主要原因。因此,靶向结肠癌中的肿瘤干细胞是改善结肠癌患者的治疗疗效和生存期的关键。

声动力疗法(sonodynamic therapy,SDT)是一种新兴的抗肿瘤方法,近年来在癌症治疗中受到重视[6,7]。其中,低频超声(low-frequency ultrasound,LFUS)由于空化效应,可在细胞膜上形成小孔,增加大分子物质的摄取,也可诱导敏感细胞发生凋亡,同化疗药物联合使用,可以产生更好的协同抗肿瘤效果而受到研究者们的青睐[8,9]。在本研究中,我们假设LFUS对结肠癌细胞的刺激可以增强其对化疗药物治疗的敏感性,比较有无LFUS刺激的细胞增殖、凋亡差异以及CSCs集落的形态变化等。这将为结肠癌的治疗提供一种新的思路和治疗方法。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与试剂

人结肠细胞系HT-29(购自武汉中国细胞研究中心);无血清高糖细胞DMEM培养基(美国Hyclone公司);10 000 U/ml penicillin和10 000 μg/ml streptomycin(美国Hyclone公司);磷酸盐缓冲液(PBS)(美国Hyclone公司);胎牛血清(FBS)(美国Hyclone公司);0.25%胰酶(美国Hyclone公司);BCA蛋白……