孙 涛

（泰安市食品药品检验检测研究院 食品工程，山东泰安 271099）

由黄曲霉毒素（AF）导致的食品生产安全问题已经成为人们十分关注和重视的问题之一。本文以ELISA检测技术对5类食物中黄曲霉毒素B1进行测定，探究该种检测技术针对食品中黄曲霉毒素Bsub1/sub检测价值。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

此次试验中涉及到的试剂以及仪器如表1所示。

表1 设备以及仪器介绍

1.2 试验方法

1.2.1 采集样本

此次研究中相关食品样品均由当地超市中随机购买，共计10样，其中酱油3样，醋2样，大米2样，面粉2样，食用油1样。

1.2.2 样本提取

在对样本进行提取过程中，严格按照国家标准《食品中黄曲霉毒素的测定方法》（GB/T 5009.22—1996）[1]中的相关要求进行处理。

（1）酱油提取。取出5.0 g样本放置在小烧杯中，加入蒸馏水（5 mL）后放置250 mL漏斗中，向其中加入三氯甲烷（20 mL）并且滴入1 g氯化钠溶液，摇匀，静置。使用无水硫酸钠进行过滤（50 mL），加入三氯甲烷后进行漏斗过滤，将蒸发皿放置通风良好环境，进行65 ℃水浴后冷却，向其中加入甲醇（25 mL）保证凝结物溶解获得待检测样本。

（2）醋提取。获得醋（10 mL）放置容量瓶（50 mL）内部，加入蒸馏水（10～12 mL）振荡摇匀，且加入氢氧化钠（10 mol/L）保证pH数据为7.0，加入甲醇（25 mL）使用蒸馏水（50 mL）定容，放置15 min待检测。

（3）面粉提取。取面粉（5.0 g）于三角瓶（100 mL）中，加入甲醇水（25 mL，1∶1），振荡0.5 h，过滤，获得检验样本。

（4）大米提取。取大米（5.0 g）于三角瓶（100 mL）中加入甲醇水（25 mL，1∶1），振荡0.5 h，过滤，或者检测样品。

（5）食用油提取。取食用油（5.0 g）于小烧杯（25 mL），加入石油醚（20 mL）放置在分液漏斗（250 mL）中，加入甲醇水（25 mL，1∶1）振荡5 min，提取甲醇水进行稀释。依据试验需要将该溶液进行10 μg/mL标准溶液配制，用甲醇、PBS溶液将该标准溶液稀释至0.05 μg/kg、0.10 μg/kg、0.50 μg/kg、1.50 μg/kg 和 10.00 μg/kg。……