王维强，陈广鸿，叶晓莹，黄华聪，杜秀婷，黄玉筠，高卓维，，，4*

（1.广州中医药大学顺德医院，广东 佛山528300；2.南方医科大学中医药学院分子生物学实验室 国家中医药管理局三级科研实验室，广东 广州510515；3.南方医科大学顺德医院，广东 佛山528308；4.南方医科大学第三附属医院，广东 广州510630）

胶质母细胞瘤是在大脑最常见的原发性恶性肿瘤，约占颅内肿瘤的40%［1］。尽管包括手术、放疗和化疗在内的治疗策略取得了重大进展，但胶质母细胞瘤患者的5 年整体存活率仍然很低［2］。胶质母细胞瘤局部异常增殖和侵袭是患者死亡的主要原因，目前临床上只有替莫唑胺和卡莫司汀两种药物用于治疗胶质母细胞瘤，然而这两种药物均伴有极大的副作用以及容易产生耐药性，因此寻找新的治疗药物是亟需解决的［3］。本研究拟通过U87 胶质瘤细胞模型，并给予抗癌解毒开窍方含药血清进行干预，观察抗癌解毒开窍方治疗胶质瘤作用并进一步探讨抗癌解毒开窍方抑制胶质瘤的作用机理。

1 材料和方法

1.1 动物和细胞

SD 大鼠购自广州中医药大学动物实验中心，实验单位使用许可证号SYXK（粤）20200056，动物实验通过广州中医药大学实验动物伦理委员会伦理审查（20210731001），U87 细胞购买自中科院上海细胞库。

1.2 试剂

DMEM 高糖培养基、胎牛血清（FBS）、0.25%胰蛋白酶购买自美国Gibco 公司。CCK-8 购买自北京同仁。结晶紫染色液购买自凯基生物科技有限公司。PI3K（ab32089）、p-PI3K（ab278545）、Akt（ab18785）、p-Akt（ab81283）、GAPDH（ab8245）抗体购自美国Abcam 生物科技有限公司。

1.3 中药配制及含药血清制备

中药购买自致信药业，抗癌解毒开窍方由常规人的用量为：藤梨根90 g、山慈菇15 g、半枝莲15 g、龙葵15 g、肿节风20 g、壁虎10 g、土鳖虫5 g、桃仁10 g、石菖蒲5 g。……