张冰洁，水雯箐†

①上海科技大学 iHuman研究所，上海 201210；② 上海科技大学 生命科学与技术学院，上海 201210

G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptor,GPCR）是人体中最大的一类膜蛋白受体家族，参与调控多种重要的生理和病理过程，因而也是一类极为重要的药物靶标。据统计，超过30%的上市药物通过靶向特定的GPCR发挥治疗作用[1]。因此，各大制药企业和科研单位都在不遗余力地筛选、设计靶向特定GPCR的新型配体，以期获得高效价、高选择性的药物先导化合物。

目前，以GPCR为靶标蛋白进行配体筛选的方法多种多样，各种技术依据其特点应用于药物先导化合物早期发现流程中的各个阶段。根据技术原理和检测方式的差异，通过湿实验进行GPCR配体筛选的方法主要分为以下三类：基于受体-配体亲和作用（affinity/binding-based）的筛选方法、基于蛋白热稳定性（stability-based）的筛选方法以及基于细胞信号通路活性检测（cell signaling-based）的筛选方法。基于受体-配体亲和作用的筛选方法可检测GPCR靶蛋白与化合物的直接相互作用，并定量亲和力的高低。其中DNA编码化合物库（DNA encoded library,DEL）筛选技术因其庞大的筛选规模（数十亿化合物）和高效的检测手段（高通量测序）成为当前新药发现领域最前沿的技术之一[2-5]，而且已经成功应用于GPCR的配体筛选和发现[6-8]。然而需要指出的是，DEL技术通常需要对化合物进行DNA偶联反应，该步骤可能影响或破坏化合物与受体的天然相互作用。亲和质谱技术是另一种迅速发展、得到广泛关注的GPCR配体筛选方法[9-14]，同样基于对受体-配体结合的检测。……