王若溪,王同生

(1.河南科技大学应用工程学院临床医疗系，河南 三门峡 472000；2.河南科技大学第一附属医院，河南 洛阳 471003)

目前，肥胖人群非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的患病率在增加，但学界对NAFLD的发生机制及其对肝功能的影响尚不完全清楚[1]。代谢紊乱，腹内脂肪增加，在肝脏中均可能表现为NAFLD。内脏脂肪组织作为“内分泌器官”，导致了病理性肥胖和大量细胞因子和脂肪因子的分泌[2]。网膜蛋白-1(Omentin-1)和血管紧张素Ⅱ1型受体相关蛋白内源性配体(Apelin)是内脏脂肪组织分泌的新型脂肪因子，可能与高胰岛素血症、炎症、代谢综合征有关[3]。本研究旨在探讨NAFLD患者Omentin-1、Apelin、白细胞介素-6(IL-6)和C反应蛋白(CRP)血清水平，并与健康人群进行对照研究，评估Omentin-1、Apelin与肥胖患者，特别是与中心性肥胖患者的IL-6和CRP关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2014年3月至2019年3月在河南科技大学第一附属医院消化科门诊和住院病房诊断的NAFLD患者，患者均符合NAFLD的诊断标准(参照2010年中华医学会肝脏病学分会《非酒精性脂肪性肝病诊疗指南》[4]，以下简称指南)。排除标准[4]：(1)有饮酒史或饮酒折合乙醇量男性每周大于140 g，女性每周大于70 g；摄入乙醇量=摄入体积×酒精度×0.8；(2)既往有病毒性肝炎、药物性肝炎等肝脏病史及其他可导致脂肪肝的特定疾病(如肝豆状核变性等)；(3)近期有创伤、手术、感染史；(4)内分泌和代谢或肾脏疾病；(5)应用过糖皮质激素、食物补充剂(维生素A、C、E)，或服用可能影响脂质或碳水化合物代谢的药物。入选患者由3名固定的、有经验的高年资医生讨论通过。最终纳入138例NAFLD患者作为NAFLD组，其中男53例，女85例；年龄35～50岁，平均(43.8±6.1)岁。

选择同期肝功能正常、经B型超声检查无脂肪肝症状，且无饮酒史或饮酒折合乙醇量符合指南标准的人群作为对照。最终纳入129例无NAFLD健康体检者作为对照组，其中男50例，女79例；年龄35～51岁，平均(42.7±7.5)岁。两组研究对象年龄、性别比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究经河南科技大学第一附属医院伦理委员会审批通过，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1肝脏B超检查 所有研究对象由固定的、有经验的超声医生应用Elegra-Siemens公司(德国)B超仪扇形探头(3.5～5.0 MHz)进行检查。参照指南中NAFLD的B超诊断标准进行诊断[4]。

1.2.2血生化参数检测 于上午8时空腹采取所有研究对象的静脉血，均采用河南科技大学第一附属医院临床检验中心的全自动生化分析仪(美国通用电气,型号：BHBMD1600)检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)，谷草转氨酶(AST)。

1.2.3CRP、IL-6检测 于上午8时抽取所有研究对象的肘静脉血4 mL,注入干燥试管，在4 ℃下以3 000 r/min离心15 min，分离血浆于-80 ℃下保存待测。通过酶联免疫吸附法(ELISA)测量CRP、IL-6。ELISA试剂盒由上海晶天生物科技有限公司提供，严格按照操作说明书进行。

1.2.4Omentin-1和Apelin检测 于上午8时抽取所有研究对象肘静脉血8 mL,注入加有10%乙二胺乙酸二钠30 μL及抑肽酶40 μL抗凝剂的试管中，混均，在4 ℃下，以3 000 r/min离心15 min，分离血浆于-80 ℃下保存待测。通过ELISA测量Omentin-1和Apelin，严格按照操作说明书进行。

2 结 果

2.1两组临床特征比较 两组腰围(WC)、体重指数(BMI)、FBG、TCH及LDL-C、TG水平比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。而两组年龄、性别及HDL-C、ALT、AST水平比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组临床特征比较

2.2两组IL-6、CRP、Apelin和Omentin-1水平比较 NAFLD组IL-6、CRP、Apelin水平均高于对照组，Omentin-1水平低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.01)。见表2。

表2 两组IL-6、CRP、Omentin-1和Apelin的比较

2.3相关性分析 Apelin水平分别与BMI、WC、TCH、LDL-C、CRP、IL-6呈正相关(P<0.01)；与HDL-C、Omentin-1呈负相关(P<0.01)。血清Omentin-1水平与WC、CRP、IL-6呈负相关(P<0.01)，与HDL-C呈正相关(P<0.01)。见表3。

表3 NAFLD相关参数与Apelin、Omentin-1的相关性分析

2.4logistic回归分析 将是否有NAFLD作为因变量(0为否，1为是)，从NAFLD相关性的变量中剔除r>0.300的变量，与以Omentin-1、Apelin、WC、BMI、TCH、HDL-C、LDL-C、CRP、IL-6为自变量进行logistic回归分析，结果表明，Omentin-1、Apelin、WC、CRP、IL-6为患者发生NAFLD的独立相关因素[β：1.084～3.132,比值比(OR)：2.034～5.021，95%置信区间(95%CI)：1.012～9.397，P<0.01]。见表4。

表4 NAFLD单变量logistic回归分析

3 讨 论

NAFLD是一种除酒精和其他明确的损伤肝因素所导致的以弥漫性肝细胞大泡性脂肪病变为主要特征的肝脏病变，发病率高达20%，已成为我国常见的慢性肝病之一，也是心、脑、血管疾病的一种危险因素[4]。NAFLD是代谢综合征的组成部分，转氨酶检测正常的非酒精性脂肪性肝病，是NAFLD的早期阶段，与胰岛素抵抗(IR)合并的糖脂代谢紊乱密切相关[5]。

研究发现，在肥胖患者中，Omentin-1基因表达是下降的[6]。与肥胖人群相比，体型偏瘦的人血Omentin-1浓度更高。低Omentin-1水平与IR、糖耐量减低密切相关。Omentin-1与肥胖、IR等代谢紊乱呈负相关性[7]。Omentin-1通过抑制胞外调节蛋白激酶/NF-κB通路活性，降低炎症细胞诱导的内皮黏附分子的表达。因此，网膜素还具有抗炎、抗动脉粥样硬化作用[8]。本研究发现，Omentin-1是NAFLD发生的独立危险因素。血清Omentin-1水平与BMI无关，Omentin-1与WC呈负相关，表明在表述身体脂肪分布方面，WC比BMI可能更好些。Omentin-1的血清水平与NAFLD患者的HDL-C水平呈正相关，提示Omentin-1可能是NAFLD发生的保护因素。

Apelin被称为“脂肪来源的激素”，在大脑、下丘脑和胃中产生，也由人和小鼠脂肪细胞分泌[9]。研究表明，Apelin在脂肪细胞的形成过程中有异常的表达[9]，提示Apelin与脂代谢紊乱及IR有一定的关系[3]。本研究中，Apelin水平与WC、BMI、THC、LDL-C、CRP、IL-6呈正相关,与HDL-C、Omentin-1呈负相关。Apelin是NAFLD的独立危险因素，提示Apelin可被视为肝脏炎症过程的生物标志物。研究报道，Apelin在NAFLD发病机制中的作用，可能与肝脏中的异位脂肪堆积有关[10]。当脂代谢紊乱损害内皮细胞时，富含胆固醇的低密度脂蛋白进入内皮细胞后被氧化，氧化的低密度脂蛋白可对细胞产生损害，受损害的血管壁可能使血管内皮细胞内的Apelin释放，引起血浆Apelin水平增高；脂肪变性肝细胞可表达脂肪细胞特异性基因及部分脂肪细胞因子，可能是引起NAFLD患者血浆Apelin水平增高的另一重要途径[10]。但脂肪变性时肝细胞如何表达脂肪细胞因子，还有待进一步研究证实。

IL-6可诱导肝脏合成CRP，还可刺激肝脏分泌极低密度脂蛋白，导致高三酰甘油血症，肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6可参与调节其他脂肪因子的分泌[11]。本研究发现CRP、IL-6分别是Omentin-1、Apelin的独立影响因素,推测Omentin-1、Apelin在NAFLD患者体内表达可能受到IL-6、CRP炎症因子的影响。推测IL-6、CRP在NAFLD发病机制中的作用可能如下：随着人脂肪含量(尤其是内脏脂肪含量)增多，游离脂肪酸脂解增强，TNF-α、IL-6、CRP等炎症因子表达增强，致使机体处于慢性炎症状态，Omentin-1表达由于受到炎症因子的抑制，其表达水平降低，抗炎作用减弱，致使机体慢性炎症持续存在，并逐渐加重，进而促进NAFLD的发生,而Apelin则因为炎症因子的作用，表达增加，促进了NAFLD的发生[6，12]。

总之，NAFLD患者Omentin-1、Apelin、IL-6、CRP水平与健康者有差异。Apelin可能是NAFLD发生的预测因子，而Omentin-1可能是预防NAFLD发生的保护性因子。其机制可能与炎症因子有关。具体机制需进一步研究。