黄棒菜超氧化物歧化酶 (SOD) 分离纯化的技术
2021-02-01徐璐赵秩颢郑彩霞
徐璐,赵秩颢,郑彩霞
北京林业大学生物科学与技术学院(北京 102442)
黄棒菜(Rheum palmatumL. var.)是蓼科、酸模属的多年生草本植物,为掌叶大黄(Rheum palmatumL.)的改良品种,由北京天力宏泰科技发展有限公司培育并投入市场。黄棒菜耐寒耐旱、耐盐碱、耐瘠薄,适宜种植区域广泛;速生高产,生长最快时每昼夜可达7~10 cm,一次播种可稳定高产20年;营养成分丰富,每100 g植物粉含有蛋白质25 g、纤维素29 g、叶绿素821 mg、维生素E 888 mg,作为牧区饲草推广使用;超氧化物歧化酶(SOD)含量高,每克酶活力达14.17 U,具有作为SOD提取原料的巨大潜力[1]。
SOD是一种广泛存在于生物体内的核编码酸性金属酶[2-3],可分为3种类型:Cu/Zn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD[3-4]。作为抗氧化系统的第一道防线[5-6],SOD可催化超氧阴离子的歧化反应,清除体内活性氧(ROS),抑制肿瘤、癌症等疾病诱发[7-8]。在食品、化妆品、临床医学、农业等领域中SOD应用广泛[9-10]。中国多以动物血液生产SOD,其成本高、安全性差,且存在致热因子、病毒等污染物残留的风险[2,11],因此寻找生产SOD的植物来源具有重要意义。由于黄棒菜安全性高、成本低且SOD含量丰富,试验以其为材料,研究提取SOD的最佳条件并建立SOD分离纯化的技术体系,为黄棒菜进一步开发利用提供试验参考。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
黄棒菜(Rheum palmatumL. var.)-80 ℃贮存干叶及新鲜叶茎、叶片(北京天力宏泰科技发展有限公司)。
磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、丙酮、磷酸、乙醇、盐酸、甘油、溴酚蓝、冰醋酸(北京化工厂);乙二胺四乙酸二钠、丙烯酰胺、Tris、甘氨酸、TEMED(北京拜尔迪生物公司);牛血清白蛋白(Ⅴ)(北京红星生化技术公司);TCA(山东西亚化学股份有限公司);……
