赵妍，路清宇

河南工业大学粮油食品学院（郑州 450001）

黑小麦麸皮是一种优质的蛋白资源[1]，将黑小麦麸皮蛋白进行酶解得到具有抗氧化能力的活性肽，是一种开发麦麸蛋白的有效途径。试验采用黑小麦提取麸皮蛋白，通过双酶分步酶解制得抗氧化肽，使用单因素试验和正交法优化提取工艺，为黑小麦麸皮抗氧化肽的理论研究及其相关产品的开发提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

黑小麦（农大876），泰安绿得农业有限公司；碱性蛋白酶（200 000 U/g）、风味蛋白酶（30 000 U/g）、木瓜蛋白酶（800 000 U/g）、中性蛋白酶（60 000 U/g）、胰蛋白酶（250 000 U/g），北京索莱宝生物科技有限公司；总抗氧化能力测试盒、总蛋白定量测试盒，南京建成生物工程研究所；其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器与设备

TGL-18MS高速冷冻离心机，上海卢湘仪器有限公司；Phs-3c酸度计，上海大普仪有限公司；LGJ-10C型冷冻干燥机，北京四环科学仪器厂；TV-1819型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限公司；Multiskan FC型酶标仪，赛默飞世尔仪器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 黑小麦麸皮蛋白的提取

黑小麦润麦磨粉得到麸皮，粉碎后过孔径0.250 mm筛，加蒸馏水调节至料液比为1∶15（g/mL）后，调节pH到9，55 ℃振荡60 min，离心（3 600 r/min）30 min取上清液，残渣重复上述步骤。将2次上清液混匀，调节pH至4.8，离心（3 600 r/min）30 min，取沉淀冷冻干燥。

1.3.2 黑小麦麸皮蛋白的酶解

黑小麦麸皮蛋白加蒸馏水至浓度2%，调节pH，37 ℃搅拌15 min，加入酶进行酶解，控制时间和温度，结束后将其置于92 ℃灭酶10 min，8 000 r/min离心15 min，取上清液测水解度、肽得率及总抗氧化活性。用最优条件将第一步酶解进行至灭酶后，加入第二步酶进行酶解，重复上述操作测定3种指标，上清液冷冻干燥。……