周超 温天明 胥丽 刘杰 邬昊 李钊

(1.成都市第一人民医院急诊科，四川 成都 610094;2.重庆医科大学附属第二医院肝胆外科，重庆 400010)

脓毒症(sepsis)是由感染引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)，是重症加强护理病房患者常见的并发症之一，具有很高的致死率[1-2]。当脓毒症发作时，患者体内首先发生了过度的炎症反应，致多器官衰竭以及内皮功能紊乱，进而导致患者死亡[3-4]。过去数十年的研究主要集中在通过抗炎治疗控制过度炎症反应造成的损害，然而当患者渡过了初期的过度炎症反应，随后进入持久性的免疫抑制阶段，无法抵御原发感染或二次感染，造成了患者在该阶段的死亡[5-7]。对脓毒症诱导免疫机制的研究发展做出了激发患者免疫功能恢复的全新治疗理论[8]，程序性死亡受体1/配体1(programmed cell death protein 1/programmed cell death ligand 1,PD-1/PD-L1)通路在宿主和病原作用的免疫调节中起着相当重要的作用，同时PD-L1也是脓毒症免疫抑制的关键基因[9-10]。miR-140是一种microRNA，可靶向作用与目标基因3′UTR区域调控基因表达，一些癌症方面的研究表明miR-140和PD-L1存在靶向作用关系[11-12]，而miR-140是否通过靶向作用PD-L1还未见报道。本研究通过盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)建立小鼠脓毒症模型，探讨miR-140靶向PD-L1在小鼠脓毒症免疫抑制中的作用，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料 肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)ELISA试剂盒、PD-L1-APC抗体、CD4-FITC/CD8-PE抗体(美国eBioscience公司)；miR-140 agomir、miR-140 mimic、mimic NC(上海吉玛制药技术有限公司)；实验所用引物由北京擎科生物科技有限公司提供，Trizol提取液、RIPA裂解液、ECL显色液(北京索莱宝生物技术有限公司)；反转录和SsoFastTMEva-Green®Supermix试剂盒(美国Bio-rad公司)；……