何登坤，朱 梦，朱 蕊

(江苏九旭药业有限公司，221200，江苏，徐州)

0 引言

盐酸丁卡因化学名为4-(丁氨基)-苯甲酸-2-(二甲氨基)乙酯盐酸盐，主要用于表面麻醉。在盐酸丁卡因制备的过程中，使用了甲苯、乙醇和丙酮等有机溶剂，但甲苯中可能存在苯，而这些溶剂在药物中残留会增加药品的毒副作用，因此需要对药品在生产中引入的残留溶剂进行检测[1]，以保证药品的安全性。

目前，对于有机残留溶剂的检测，有GC法[2-7]、GC-MS法[8]。有文献报道使用顶空-气相色谱法[9]对盐酸丁卡因中可能存在的残留溶剂进行检测。

为了控制本品的质量，保证药品的疗效与安全，本研究结合制备工艺，根据ICH Q3C(R7)及2020版中国药典通则[10]中对残留溶剂的进行控制，用顶空-气相色谱法对本品中可能存在的甲苯、苯、乙醇和丙酮有机溶剂的残留量进行了测定。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent 7890B型气相色谱仪(安捷伦科技有限公司)，梅特勒XSE205DU电子天平(梅特勒-托利多仪器(中国)有限公司)，DB-624毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm×1.8 μm)。苯(分析纯，西陇化工股份有限公司)、甲苯(分析纯，西陇化工股份有限公司)、丙酮(分析纯，西陇化工股份有限公司)、无水乙醇(分析纯，安徽安特食品股份有限公司)，DMSO(顶空色谱级，Scharlau)和超纯水(自制)。

1.2 溶液的配制

混合对照品储备溶液：精密称取苯约200 mg，置于10 mL容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL置100 mL容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，作为苯储备液。分别称取甲苯约89 mg，乙醇约500 mg、丙酮约500 mg，精密称定，同置于100 mL容量瓶中，再精密加入苯储备液1 mL，用DMSO至刻度，摇匀，制得每1 mL中含有苯2 g，甲苯890 g，乙醇5 mg，丙酮5 mg的混合对照品储备液。

混合对照品溶液：精密移取混合对照品储备液5 mL置50 mL容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，即得100%混合对照品溶液；分别量取7.5 mL、6 mL、4 mL、2.5 mL和1 mL的混合对照品储备液置50 mL容量瓶中，用DMSO稀释至刻度，摇匀，即得150%、120%、80%、50%和20%混合对照品溶液。

供试品溶液：取盐酸丁卡因约0.5 g，精密称定，置20 mL顶空瓶中，精密加入二甲基亚砜5 mL，压盖密封，即得。

1.3 色谱条件

采用DB-624毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm×1.8 μm)，FID检测器，进样口温度200 ℃，检测器温度250 ℃，柱温：以40 ℃为起始温度，保持6 min，以5 ℃/min升温速度升温至70 ℃，保持4 min，再以20 ℃/min的升温速度升温至200 ℃，保持2 min。顶空进样瓶平衡温度为90 ℃，平衡时间为15 min。载气流速:1.5 mL/min，分流比为10:1，进样量：1 mL。

2 结果与讨论

2.1 专属性

分别取空白溶液、100%混合对照品溶液各5 mL置20 mL顶空瓶中，压盖，按色谱条件测定，结果见图1。各色谱峰出峰顺序依次为乙醇、丙酮、苯和甲苯，从色谱图可以看出，空白溶剂对测定无干扰，各残留溶剂之间的分离度均大于1.5，符合要求。

(a)空白溶液

2.2 检测限与定量限

取100%混合对照品溶液，用DMSO逐步稀释，按照色谱条件检测，以约3倍信噪比为检测限浓度(S/N=3)，以约10倍信噪比为定量限浓度(S/N=10)。结果见表1。

表1 检测限与定量限的结果

2.3 线性与范围

取2.2项下的定量限溶液20%、50%、80%、100%、150%的6个浓度作为线性溶液，按“1.3色谱条件”测定，以峰面积-浓度作图，考察各组分的线性关系。具体结果见表2。

表2 线性方程及相关系数

由表2可知，乙醇、丙酮、苯和甲苯在一定浓度范围内具有良好的线性，其相关系数R2均大于0.999。

2.4 重复性

称取6份盐酸丁卡因0.5 g，置20 mL顶空瓶中，加入100%混合对照品溶液5 mL，压盖，即得100%加标供试品溶液(因供试品溶液中，乙醇、丙酮、苯和甲苯的含量均低于定量限，所以采用100%加标供试品溶液测定)，按色谱条件检测。结果见表3。

表3 重复性结果

由表3可知，6份100%加标供试品溶液中各溶剂含量的RSD均小于5%，符合要求。

2.5 回收率

称取盐酸丁卡因0.5 g，共9份，置20 mL顶空瓶中，分别加入80%、100%和120%混合对照品溶液各5 mL，压盖，每个浓度加标溶液平行制备3份。在色谱条件下测定，计算结果。结果见表4。

表4 回收率试验结果

由表4可知：平均回收率在93.1%～103.3%，RSD在2.1%～4.9%，表明方法有较高的准确度。

2.6 样品分析

取3批样品按色谱条件进行检测，结果表明：3批样品中均未检出苯、甲苯和乙醇，丙酮结果见表5。

表5 样品分析结果

3 讨论

顶空-气相色谱法测定残留溶剂时，通常以水为溶剂，但本文测定的残留溶剂中苯和甲苯不溶于水，故选择N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)作为溶剂进行测定。因为DMSO的毒性小于DMF，且对样品的测定无干扰，故本研究选择DMSO作为溶剂测定。本研究所建立的顶空-气相色谱法测定盐酸丁卡因中4中残留溶剂的残留量，该方法的专属性强，灵敏度高和准确性好，能满足药物分析的要求。