吴刚强 毛 叶 温小凤 谭 军 卜献春

(湖南省中医药研究院附属医院内分泌老年病科，长沙市 410006,电子邮箱：wugq2011@126.com)

近年来，随着人们生活水平的提高和饮食结构的改变，糖尿病的发病率呈现逐年上升的趋势[1]。目前现代医学对糖尿病的研究取得了较大进展，胰岛素抵抗仍然被认为是2型糖尿病发病的中心环节。近年来，西医的新药物的不断研发使得2型糖尿病的治疗出现了新的转机，但由于其副作用大、价格昂贵、容易引起低血糖反应、不易操作等特点，限制了其广泛应用。最近研究表明[2]，中医药治疗2型糖尿病取得了较好的成果，在增强疗效、缓解症状、改善患者的生活质量、延长寿命、减少不良反应等方面显示了较大的优势。滋膵通脉饮为本院卜献春主任医师经验方，前期临床研究显示[3]，该方治疗糖尿病患者疗效确切，不仅能降低血糖和超敏C反应蛋白水平，而且还能改善胰岛素抵抗。本研究采用高脂饲料饮食加注射链脲佐菌素的方法建立2型糖尿病大鼠模型，探讨滋膵通脉饮降低血脂血糖和改善胰岛素抵抗的效果，为临床研究提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 45只清洁级SD大鼠，体重200～220 g，由湖南中医药大学实验动物中心提供，许可证号SCXK(湘)2016-0002～2019-0004，常规条件饲养，室温20℃～27℃，湿度50%～60%。

1.2 动物造模 45只大鼠适应性喂养1周后按体重编号，采用随机数字表法随机抽取10只作为空白对照组，给予普通饲料喂养。剩余35只给予高脂饲料饮食(猪油10%、胆固醇2%、胆酸盐0.5%、蔗糖20%、普通饲料67.5%)，连续喂养4周，建立胰岛素抵抗模型。随后给予大鼠隔夜禁食(不禁水)12 h以上，将链脲佐菌素(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)溶入配好的0.1 mmol/L柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液(pH=4.3)中，将其以30 mg/kg注入大鼠腹腔内，单次注射，建立2型糖尿病大鼠模型，而空白对照组给予腹腔注射等量(0.1 mmol/L)柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液。造模3 d后大鼠禁食(不禁水)8 h以上，检测空腹血糖，若空腹血糖>11.1 mmol/L为模型制备成功[4]。造模过程中大鼠死亡4只，最终造模成功31只。造模成功后再继续给予大鼠高脂饲养2周以强化胰岛素抵抗模型[5]。

1.3 药物 (1)滋膵通脉饮：由湖南省中医药研究院附属医院药剂科生产，主要由黄芪、生地、麦冬、玄参、山茱萸、天花粉、地龙、生蒲黄、丹参、川芎、鬼箭羽、全蝎、水蛭、僵蚕、山楂等药物组成。将上述药物按照适当比例配置，加水提取2次。一煎加8倍量水提取1.5 h；二煎加6倍量水提取1 h；合并提取液，过滤，浓缩，微波真空干燥制成干浸膏，粉碎制粒，加适量糊精，制成颗粒剂，60℃以下干燥整粒成成品，4℃冰箱中保存备用。(2)罗格列酮片：生产企业为葛兰素史克(天津)有限公司，国药准字20H450072，规格4 mg/片。

1.4 动物分组和给药 采用随机数字表，从造模成功的大鼠中随机抽取30只，并分为模型组、滋膵通脉饮组和罗格列酮组，每组10只。于实验第7周开始灌胃给药，滋膵通脉饮组灌服滋膵通脉饮，生药量为17.6 g/kg；罗格列酮组灌服罗格列酮混悬液(灌胃前将其碾碎，用生理盐水配置成罗格列酮混悬液)按0.42 mg/(kg·d)给药；空白对照组和模型组均灌服同等体积的蒸馏水。各组均每天上午灌胃，1次/d，共用药4周。以上计量均按60 kg成人体表面积换算，灌胃容量为10 mL/kg体重。

1.5 观察指标 用药4周后，大鼠尾静脉采血1 mL，室温血液自然凝固10～20 min后，离心20 min左右(2 000～3 000 r/min)，收集上清。检测血清胆固醇、三酰甘油、LDL水平，以及空腹血糖、空腹胰岛素，计算稳态模型胰岛素抵抗(homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)指数[(空腹血糖×空腹胰岛素)/22.5]。血清胆固醇、三酰甘油酶联免疫分析检测试剂盒均由Sigma公司生产(商品编号：M3128、T740-5g)，LDL酶联免疫分析检测试剂盒由Abcam公司生产(商品编号：Ab3107)，大鼠胰岛素酶联免疫分析试剂盒购自上海信帆生物科技有限公司(规格96T)，血糖仪购自三诺生物传感股份有限公司。

1.6 统计学分析 采用SPSS 16.0软件进行统计分析。计量资料以(x±s)表示，组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t法或Dunnett法。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 4组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR指数比较 与空白对照组比较，其他各组空腹血糖、空腹胰岛素水平和HOMA-IR指数均升高(均P<0.05)；与模型组比较，滋膵通脉饮组和罗格列酮组空腹血糖、空腹胰岛素水平和HOMA-IR指数降低(均P<0.05)；而滋膵通脉饮组和罗格列酮组之间以上指标差异无统计学意义(均P>0.05)。见表1。

表1 4组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR指数比较(x±s)

2.2 4组大鼠血脂水平比较 与空白对照组比较，其他各组胆固醇、三酰甘油和LDL水平升高(均P<0.05)；滋膵通脉饮组胆固醇、三酰甘油和LDL水平均低于模型组(均P<0.05)，而罗格列酮组和模型组以上指标差异无统计学意义(均P>0.05)；滋膵通脉饮组三酰甘油水平低于罗格列酮组(P<0.05)。见表2。

表2 4组大鼠血脂水平比较(x±s，mmol/L)

3 讨 论

糖尿病是一种以慢性高血糖为特点的代谢紊乱。近年来，胰岛素抵抗是2型糖尿病及多种代谢性疾病发生和发展的中心环节。而胰岛素在体内对血糖起着负向调节作用，在正常情况下其随着血糖的波动而有一定的起伏。胰岛素增敏剂罗格列酮是治疗糖尿病的一种药物，它通过增加胰岛素的敏感性而降低血糖，对于胰岛素抵抗的2型糖尿病患者有一定疗效。本研究结果显示，罗格列酮组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平和HOMA-IR指数均低于模型组(均P<0.05)，说明其对血糖和胰岛素的调节均有一定的作用。但该药副作用大，易导致水钠潴留、骨折、增加体重、加重心衰，限制了其临床的广泛应用。最近研究表明，中医药治疗2型糖尿病疗效确切，不仅能降低血糖、改善胰岛素抵抗，而且还能减少炎症反应，调节血脂代谢紊乱，且副作用少，疗效确切[6-8]。

滋膵通脉饮方系《医学衷中参西录》“滋膵饮”加活血通络药物组成。方中生地、麦冬、玄参、山茱萸、天花粉可以滋养五脏之阴，生津润燥，现代药理研究显示，山茱萸的有效成分山茱萸总萜能调节糖尿病小鼠体内糖脂代谢过程，对糖尿病有治疗作用[9]。玄参的有效成分玄参多糖对糖尿病大鼠有明显的降低血糖作用[10]。方中丹参、川芎、生蒲黄、地龙、水蛭、鬼箭羽均可活血化瘀，其中鬼箭羽具有降糖、降脂、保护心脑血管作用[11]；丹参提取物丹参多酚酸盐能降低糖尿病患者血糖，发挥血管保护作用，改善血管内皮功能[12]。黄芪可以益气升阳，助主药活血通络；佐以僵蚕、全蝎息风通络，山楂消食活血，同时防止滋阴活血药物碍胃。研究显示，山楂的有效成分山楂叶总黄酮有明显降低糖尿病大鼠血脂血糖的作用，而且还能改善糖尿病大鼠的抗氧化能力[13]。全方具有益气养阴、活血通络之效。前期临床研究表明，滋膵通脉饮不仅有明显的降糖、降脂作用，而且治疗糖尿病性冠心病疗效显著，能降低患者血液黏稠度、改善胰岛素抵抗和临床症状[14-15]。本研究结果显示，滋膵通脉饮组的空腹血糖、空腹胰岛素和HOMA-IR指数均低于模型组(P<0.05)，但与罗格列酮组比较差异无统计学意义(P>0.05)，提示中药滋膵通脉饮能降低血糖、改善胰岛素抵抗，且疗效与罗格列酮相当。此外，滋膵通脉饮组胆固醇、三酰甘油和LDL水平均低于模型组(均P<0.05)，且三酰甘油水平均低于罗格列酮组(P<0.05)，这与上述研究结果[14-15]相似，表明滋膵通脉饮还能降低糖尿病大鼠血脂水平，调节血脂代谢紊乱，且其疗效明显优于罗格列酮。

综上所述，滋膵通脉饮不仅能降低2型糖尿病大鼠空腹血糖、改善胰岛素抵抗，还能调节血脂紊乱，至于其改善胰岛素抵抗的具体机理还需要进一步探讨。