蔡珠明，党光辉，臧鑫鑫，邵明珠，唐阳阳,2，崔子寅，宋宁宁，刘思国*

（1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队，黑龙江 哈尔滨 150069；2.吉林农业大学动物科技学院，吉林 长春 130118）

副结核分枝杆菌（Mycobacterium avium subsp.Paratuberculosis，MAP）是胞内寄生的革兰氏阳性病原菌，也称禽分枝杆菌副结核分枝杆菌亚种，属于禽分枝杆菌复合群（Mycobacterium avium complex，MAC）成员，为致病性的非结核分枝杆菌[1]，基于全基因组测序的系统进化分析，将MAP 分为3 种亚型，即C 型（牛型）、S 型（羊型）和B 型（野牛型）[2]。MAP 主要引起反刍动物的副结核病（Paratuberculo⁃sis，pTB），又称约内氏病（Johne's disease，JD），为一种慢性、接触性肠道增生性传染病，潜伏期长，临床表现为持续性腹泻、体重迅速减轻，并最终导致消耗性死亡[2]，该病严重威胁着奶牛养殖业的健康发展。奶牛主要通过接触感染牛的乳汁或粪便感染[3-4]。在兔、狐狸、白鼬和鼬鼠等许多非反刍野生动物中也能分离到MAP[5]。自从1913 年Dalziel 等首次描述牛约内氏病与人类克罗恩病（Crohn's dis⁃ease，CD）的相似性以来[6]，MAP 感染与克罗恩病的关系受到广泛关注。Martin 等通过28 个病例对照研究证实了MAP 与克罗恩病之间具有特定关联[7]。因此对于pTB 的流行病学研究势在必行。

2019 年5 月，本研究从黑龙江某规模化牛场采集35 头患副结核牛的直肠刮取物，通过PCR 鉴定和MAP 的分离培养，结果表明31 份为MAP 感染，本实验为进一步病原学和分子流行病学的研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 病料样品及菌株黑龙江某牛场副结核病抗体阳性牛的直肠刮取物样品35 份。禽分枝杆菌（Mycobacterium avium subsp. Avium，MAA）-血清II 型（CVCC276）购自中国兽医微生物菌种保藏管理中心；……