张 欣，韩先干，王亚磊，张海洋，王 权，祁克宗，蒋 蔚*，宋祥军

（1.安徽农业大学兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室，安徽 合肥 230036；2.中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241）

副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）为革兰氏阴性菌，中度嗜盐性，菌体在显微镜观察下呈现出杆状结构，兼性厌氧，可感染鱼虾蟹等，是引起人类疾病的食源性致病菌[1-2]。革兰氏阴性菌的外膜（Out⁃er membrane，OM）主要由磷脂双分子层、膜蛋白和脂多糖等物质组成，其特有的细胞壁结构[3]，可作为抵制外界环境的屏障。外膜蛋白（Outer membrane proteins，OMP）作为革兰氏阴性菌外膜的重要成分，具有多种功能。研究表明，OMP 与弧菌的黏附作用密切相关，可介导细菌侵入细胞，OMP 与细菌生物被膜形成有关；此外，研究表明OMP 作为亚单位疫苗的候选靶分子，具有良好的免疫保护性，能够有效激发宿主的体液免疫和细胞免疫反应，副作用小[4-5]。副溶血弧菌致病机制的研究中涉及到多种实验动物感染方式，包括小鼠口服感染和腹腔冲击感染[6-7]，本研究团队前期也通过小鼠腹腔冲击感染的方式来评价副溶血弧菌重要抗原的免疫效果[8-9]。

副溶血弧菌编码4 种OmpA，已有研究表明部分OmpA 蛋白在免疫原性和疫苗开发方面具有很大的潜力[10-11]。目前对副溶血弧菌的OMP 的表达纯化、抗体制备及免疫学检测方法的研究还比较少见，本研究克隆了副溶血弧菌ompA（VP0764）基因，并重组表达该蛋白，进一步制备鼠源多克隆抗体，同时利用His-OmpA（VP0764）免疫动物，研究该蛋白是否具有免疫保护性，以期为研究副溶血弧菌的基因工程疫苗和建立该菌的快速检测方法提供参考。……