羊源尸毒梭菌三重PCR 检测方法的建立及应用
2021-01-22豆朋朋
中国预防兽医学报 2020年11期
豆朋朋,王 利*,魏 勇
(1.西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部和四川省重点实验室,四川 成都 610041;2.四川省畜牧科学研究院,四川 成都 610041)
尸毒梭菌(Clostridium cadaveris)属于芽孢杆菌科,梭菌属。该菌广泛分布于土壤、海底沉积物和人的粪便中,为孢子卵圆、端生的革兰氏阳性杆菌[1]。尸毒梭菌与危害人和动物健康的3 大致病性梭菌(破伤风梭菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌)同为梭菌属,尸毒梭菌可以导致人和动物创伤感染、脓肿、菌血症等[2]。我国是养羊大国,目前仅见一篇从羊体分离出致病性尸毒梭菌的报道,该研究采用16S rDNA 基因的PCR 扩增方法对羊源尸毒梭菌进行了鉴定[2]。目前,还没有羊源尸毒梭菌快速检测的报道,因此快速检测该菌对于该菌感染的防治意义重大。23S rRNA 基因为尸毒梭菌的特异性基因。HPI 毒力岛携带有与致病性和毒力相关的基因,可能在各种细菌间存在着水平转移。irp2 基因编码与铁摄取有关的铁调节蛋白,而铁元素是保证细菌在宿主体内存活的关键因素,因此携带有irp2 的菌株可摄取铁元素,易在宿主体内存活,具有较强的毒力,因此该基因是检测HPI 毒力岛的靶标[3-4]。目前,尚无梭菌属细菌检测到HPI 毒力岛的报道。溶血素(Hemolysin,hlyA)是公认的毒力因子,它作为成孔细胞溶血素家族成员之一,可以在宿主细胞膜上形成孔道从而对宿主细胞起到杀伤作用;hlyA 编码溶血素前体、可以激活宿主体内的胰蛋白酶、具有广谱的杀细胞作用,对大部分哺乳动物细胞(如红细胞、单核细胞等)具有细胞溶解和细胞毒性作用[5-7]。……
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