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猪源产肠毒素大肠杆菌菌毛基因多重PCR 检测方法的建立及初步应用

2021-01-22刘国梅左玉柱李杰峰刘曼迪刘迎迎

中国预防兽医学报 2020年11期
关键词:检测方法

刘国梅,李 培,左玉柱,李杰峰,张 宁,刘曼迪,刘迎迎,李 妍*

(1.河北农业大学动物医学院,河北 保定 071001;2.河北省畜牧兽医研究所,河北 保定 071000)

大肠埃希氏菌病属于国家三类传染病,其中产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)在临床上可引起仔猪、犊牛、羔羊以及其他经济动物的水样腹泻,也可引起发展中国家的婴儿腹泻和发达国家的旅游者腹泻[1]。ETEC 感染对新生仔猪和断奶仔猪的危害最为严重,可引起仔猪白痢、黄痢以及水肿病。临床症状表现为呕吐、腹泻、排黄白色水样稀粪、消瘦脱水,并伴随其他疾病的继发感染甚至死亡,对养猪业造成了重大的经济损失[2]。

ETEC 菌毛类型众多,其中K88(F4)、K99(F5)、987P(F6)、F18 和F41 在我国乃至全世界流行较广[3]。菌毛也被称为黏附素,可通过结合动物小肠绒毛的特异性受体,帮助菌体定植于宿主肠道,继而释放多种肠道毒素,引起宿主水和电解质失衡,导致腹泻[4]。菌毛具有免疫原性和抗原性,为ETEC 疫苗研发的主要靶标。由于ETEC 菌毛类型众多且多为混合感染,患病动物携带菌毛种类不明确,给疾病防治带来严峻考验[5]。在我国南方地区发现F18 为ETEC 的优势菌毛,F18ab 与F18ac 两种亚型菌毛的流行状况差异很大[6-7]。而河北省缺少对该病的流行病学调查,多采用K88/K99/987p 三联疫苗预防,效果不佳,极大影响了对该病的防控。因此准确鉴定病畜所携带的ETEC 菌毛类型,有助于更好的研究其流行状况,为疫苗的研发提供重要参考依据。

ETEC 菌毛类型的传统鉴定方法包括细菌分离、革兰氏染色镜检及生化培养等,过程复杂且灵敏度不高。……

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