姜启娟，刘炳宏

（1.通化市食品药品检验所，吉林 通化 134001；2.通化市市场监督管理局，吉林 通化 134001）

1 仪器与试药

仪器：高效液相色谱仪（型号：日本岛津L C-2010AHT）、电子天平型号（BT25S 感量：0.1/0.01mg 北京赛多利斯仪器天平有限公司）；ß，ß´-二甲基丙烯酰阿卡宁对照品（由中国药品生物制品检验所提供）规格：供含量测定用；批号： 111689-200501。水为纯化水，乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：迪马C18（4.6×250mm，5µm）；流动相：乙腈－0.2%甲酸溶液（70：30）；流速： 0.8ml/min；柱温：室温；检测波长：276nm；理论板数按ß，ß´-二甲基丙烯酰阿卡宁峰计算应不低于6000。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备

精密称取ß，ß´-二甲基丙烯酰阿卡宁对照品适量，置容量瓶中，加无水乙醇－三氯甲烷（3：2）混合溶液溶解，制成每1ml含60µg的溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取约1g ，置具塞锥形瓶中，加无水乙醇－三氯甲烷（3：2）混合溶液30ml，超声处理30分钟，放冷，滤过，用无水乙醇－三氯甲烷（3：2）混合溶液洗涤残渣与滤纸，合并滤液，低温蒸干，残渣用无水乙醇－三氯甲烷（3：2）混合溶液溶解，转移至10ml量瓶中，加无水乙醇－三氯甲烷（3：2）混合溶液稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备

按处方比例配成不含紫草的样品作为阴性样品，照2.2.2供试品溶液的制备方法，制成阴性样品对照溶液。

3 方法学验证与结果

3.1 线性关系的考察

精密称取ß，ß´-二甲基丙烯酰阿卡宁对照品适量加无水乙醇－三氯甲烷（3：2）混合溶液制成每1ml含52.2µg的溶液，分别精密吸取2、6、10、14、18µl测定，以对照品量为横坐标，以峰面积为纵坐标，结果ß，ß´-二甲基丙烯酰阿卡宁在0.1044～0.9396µg范围呈良好的线性关系，计算回归方程见表1。……