杨志虹 杨孝芳 易玮 崔瑾 陈波 陈盼碧 张宁

(1广州中医药大学针灸康复临床医学院，广东 广州 510006；2贵州中医药大学针灸骨伤学院)

衰老是许多病理、生理和心理过程综合作用的必然结果，是个体生长发育最后阶段的生物学心理学过程〔1〕。中国现已成为世界第二大经济体，老龄化是社会经济发展的必然趋势，由老龄化所带来的一系列问题对中国经济社会的发展有一定的阻碍作用〔2〕。随着人口老龄化日益加重，衰老性疾病逐渐突出，国内外抗衰老的研究一直围绕着寻求简单、经济、便捷的抗衰老方法的思路在进行。本实验拟通过观察艾灸神阙穴对D-半乳糖所致衰老模型小鼠脑组织中B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关的X基因(bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶(caspase)-3、p53的表达，探索艾灸神阙穴调控细胞凋亡的作用及延缓衰老的机制。

1 材料与方法

1.1实验动物及分组 健康2月龄昆明雄性小鼠18只，体重(30±2)g，重庆腾鑫科技有限公司提供〔SCXK(军)2012-001〕，将其随机分为青年组、衰老模型组、艾灸组，每组6只，各组动物在同等条件下常规喂养，实验室光照充足，通风良好，温度保持在(22±4)℃，湿度保持在50%～70%。

1.2实验试剂 组织蛋白抽提试剂盒，BCA蛋白定量试剂盒，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶制备试剂盒，电化学发光(ECL)高灵敏度化学发光检测试剂盒(康为世纪公司)；ECL低背景学发光检测试剂盒；bax一抗、bcl-2一抗、caspase-3一抗、p53一抗(苏州睿瀛生物技术有限公司)。

1.3造模方法 参考秦红兵等〔3〕方法，衰老模型组和艾灸组每日颈背部皮下注射D-半乳糖120 mg/kg，连续注射42 d。……