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加减驻景方对脉络膜新生血管动物模型TLR-4、NF-κB 和IL-6 表达的影响

2021-01-15陶方方亢泽峰陈水龄褚文丽刘健周志豪

中国中医眼科杂志 2020年12期
关键词:中药模型

陶方方,亢泽峰,陈水龄,褚文丽,刘健,周志豪

脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)是年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)、病理性近视、中心性渗出性脉络膜视网膜病变、眼组织胞浆菌病、眼底血管样条纹等疾病共同的终末病理环节[1]。CNV 的形成是多种细胞与多种因子共同作用的结果,近年来,白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)被发现与CNV 形成也有密切的关系,AMD 患者IL-6 表达较正常人有显著升高,且疾病严重程度与IL-6 表达水平相关[2]。加减驻景方是亢泽峰教授治疗AMD 和病理性近视等伴有CNV 眼底疾病的经验用方,临床治疗有效,其作用机制尚不清晰,本研究采用组织学和分子生物学技术检测CNV 动物模型中核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路相关因子活性,探讨ToLL样受体-4(ToLL-like receptor,TLR-4)/NF-κB/IL-6信号通路在CNV 形成中的作用,从而揭示加减驻景方抑制CNV 的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

8 周龄雄性SPF 级BN 大鼠138 只,体重180~220 g,购买于北京市维通利华公司。动物许可证号:SCXK(京)2012-0001。实验前,适应性饲养3 d。

1.2 试剂与仪器

PCR 仪(Biometra,TProfessional ThermoCycler),全自动荧光定量PCR 仪(7500,ABI)。SP-9000 试剂盒(中杉金桥),NF-κB(Cell Signaling Technology),TLR-4、IL-6(Abcam),cDNA 第一链合成试剂盒(K1622,Thermo Scientific)。

1.3 实验分组与给药

大鼠任一眼为实验眼,行激光造模,每只眼光凝8~10 个点。激光功率360 mW,光斑直径50 μm,曝光时间0.05 s。按随机数字表法将造模成功的大鼠分为模型组、中药组、西药组、联合组,各30 只。空白组18 只大鼠,正常饲养,不做特殊处理。

模型组:光凝后第1 d 予生理盐水灌胃,每日1次,共21 d。

中药组:光凝后第1 d 予中药灌胃,每日1 次,共21 d。中药加减驻景方由楮实子、枸杞子、菟丝子、五味子、茺蔚子、三七粉、桂枝、茯苓、三棱、郁金、生黄芪和当归等多种药物组成,每剂中药155 g,灌胃量10 ml/kg。……

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