梁希晨，刘雪枫，王灏，景明

(1.甘肃中医药大学药学院，甘肃 兰州 730000；2.甘肃省中药质量与标准研究重点实验室，甘肃 兰州 730000；3.甘肃省中藏药化学与质量研究省级重点实验室，甘肃 兰州 730000；4.甘肃省礼县第一人民医院心内科，甘肃 陇南 742200)

1 仪器与材料

E2695高效液相色谱仪(沃特世科技上海有限公司，色谱柱为WondaSil C18-WR色谱柱)；BT125D电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)；iMark全波长酶标仪(美国伯乐公司)。

湿生扁蕾药材于2018年7月上旬采自甘肃省临潭县冶力关镇，经甘肃农业大学陈垣教授鉴定为湿生扁蕾[Gentianopsispaludosa(Munro.) Ma]。当药黄素、当药醇苷和木犀草素(成都普菲德生物技术有限公司， 批号分别为190402、190404、190328，纯度均> 98%)；甲醇、磷酸为色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。1,1-二苯基-2-三硝基苦肼(DPPH，西格玛奥德里奇上海贸易有限公司，批号：MKBS3069V)；2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS，北京百灵威试剂有限公司，批号：1436401)；抗坏血酸(Vc， 西格玛奥德里奇上海贸易有限公司，批号：MSDS5960)。

2 方法与结果

2.1 提取物制备 称取药材湿生扁蕾500 g，粉碎，分别用5倍量的水、95%乙醇、正丁醇、乙酸乙酯浸泡22 h后回流提取2 h。提取液回收溶剂后减压干燥得到干燥提取物，研细备用。水提物(A)、95%乙醇提取物(B)、正丁醇提取物(C)和乙酸乙酯提取物(D)产率分别为16.92%、15.56%、5.57%、11.66%。

2.2 HPLC同时测定当药黄素、当药醇苷和木犀草素的含量[6]

2.2.1 色谱条件 WondaSil C18-WR色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相为甲醇(A)-0.04%磷酸水(B)，梯度洗脱(0～20 min,40%～63% A；20～50 min,63%A)；体积流量0.8 mL·min-1；柱温30 ℃；检测波长254 nm；进样体积：10 μL。色谱图见图1。

2.2.2 混合对照品溶液制备 分别精密称取当药黄素、当药醇苷、木犀草素对照品1……