马 宁，魏琳琳，刁腾月，赵 璇,2，王晓梅,3，李 可

(1.西安交通大学第二附属医院科研中心实验室，陕西西安 710004；2. 商洛市中心医院检验科，陕西商洛 726000；3. 汉中市洋县人民医院检验科，陕西汉中 723300)

动脉粥样硬化是一种威胁中老年人健康的最常见的心血管疾病，是引起如心脑梗死、中风、主动脉瘤等各种急慢性心血管意外的首要病因[1]，由其引发的心脑血管病死亡是全球主要死亡原因之一。目前普遍认为动脉粥样硬化是一种血管壁的慢性炎症疾病[2]。动脉粥样硬化的炎症发病机制是一个多步骤过程[3]，其中单核/巨噬细胞发挥着重要作用[4-6]。血液单核细胞在趋化因子作用下黏附于损伤的血管内皮细胞并侵入内皮下聚集分化为巨噬细胞，吞噬脂蛋白分化为泡沫样细胞并堆积形成脂质条纹乃至脂质斑块[7-9]。本研究对比正常饮食对照及高脂饮食(8周和16周)诱导动脉粥样硬化小鼠组织及全身炎症状态，利用红色荧光染料PKH26标记纯化的外周血单核细胞，通过尾静脉注射入小鼠体内，探讨炎症微环境对单核细胞向动脉粥样硬化斑块迁徙影响，为动态观察动脉粥样硬化过程中炎症微环境状态变化、炎症细胞向斑块内迁徙提供了有效的研究方法和形态学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料油红O染料(AMRESCO)，CCL2 ELISA试剂盒(R&D Systems)，TNF-α ELISA试剂盒(BD Biosciences)，流式抗体CD45(30-F11, APC)，CD11b(M1/70, FITC)，Ly6G(1A8, PE)，Ly6C(HK1.4, PE/Cy7)(Biolegend)，PKH26红色荧光细胞标记试剂盒(Sigma-Aldrich)、Trizol、核酸染料SYBR Green、DAPI(Thermo Fisher Scientific)，反转录酶M-MLV(Promega)。流式细胞仪(BD Calibur, BD AriaⅡ)，实时定量PCR仪(ABI StepOne)，徕卡激光扫描共聚焦显微镜(Leica TCS SP8)，徕卡冰冻切片机(LeicaCM1900)，酶标仪(Bio-tek)。

1.2 实验动物……