谢 晋，杨德强，周峻岗，李翊峰，吕 红

(1.复旦大学 遗传工程国家重点实验室，上海 200438；2.无锡药明生物技术有限公司，江苏 无锡 214092；3.复旦大学 生命科学学院 上海工业菌株工程技术研究中心，上海 200438；4.上海药明生物技术有限公司，上海 200131)

猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属圆环病毒科圆环病毒属，为已知最小的感染哺乳动物病毒，包含一个循环的单链DNA基因组.猪圆环病毒2型(PCV2)是引起5～12周龄的断奶仔猪发生多系统衰竭综合征(Post-Weaning Multisy-stemic Wasting Syndrome,PMWS)的主要病原.通常该病在养猪场的发病率为20%～60%，死亡率约为5%～35%[1].PCV2相关的疾病正严重影响产猪国家的经济[2].

PCV2病毒颗粒是一个直径约20nm的20面体且为非包膜结构[3].PCV2的开放阅读框区域2(Open Reading Frame 2,ORF2)编码一个约30kDa左右的病毒衣壳蛋白Cap[4].病毒样颗粒(Virus-Like Particles,VLPs)是由病毒的一种或几种结构蛋白组装而成的与病毒颗粒类似的结构颗粒，但不含病毒核酸，不能进行自主复制.PCV2病毒VLPs由衣壳蛋白Cap组装而成，其与完整的PCV2颗粒相似，可作为一种重要的PCV2免疫原.用其制备的VLPs疫苗可诱导猪免疫系统产生抵抗PMWS的保护机制[5-6]，且免疫原性良好[7-8].鉴于VLPs与天然病毒结构的相似性、无感染性、良好的结构稳定性、出色的免疫原性以及良好的结构可塑性、独特的承载DNA及其他分子的能力，VLPs相关技术在生物医学基础研究、新型疫苗开发、新型药物递送载体开发及基因治疗中具有广阔的应用前景[1].

目前，PCV2 Cap VLPs的纯化通常采用氯化铯或蔗糖超速离心法[9-12].但在大规模纯化生产中，超速离心法将会随着规模的扩大受限于硬件以及劳……