刘国涛，张树宇，魏 凯*

（1.山东省滨州市畜牧兽医管理服务中心，山东 滨州 256600； 2.山东农业大学动物科技学院，山东 泰安）

酵母双杂交系统是研究活细胞内蛋白质与蛋白质之间相互作用的一种强大且常用的分子生物学技术。该技术不仅能够检测细胞内稳定的蛋白互作，而且可以检测微弱的或者瞬时的蛋白相互作用。实验方法具有成本低，易操作，设计简单等一系列优点，在生物学实验中的应用十分广泛。酵母双杂交技术在众多生物学相关领域应用广泛且前景广阔。本文对酵母双杂交技术的基本原理、应用、发展前景等方面进行综述。

蛋白质在生命活动的的许多过程发挥着不可或缺的作用，如细胞间的信号转导，胞内物质的代谢及细菌病毒对细胞的入侵等。研究蛋白质相互作用对于人们深入了解预防传染病，靶向治疗多基因疾病有重要意义。酵母双杂交技术设计简单及其对微弱或短暂蛋白互作的检测能力使其在互作蛋白筛选过程中得到广泛应用。

1 酵母双杂交技术的基本原理

1986年Keegan等[1]发现了酵母细胞中的Gal4结构可结合特定的DNA序列（上游激活域，UAS），从而在半乳糖存在的情况下激活转录。1989年，Fields和Song通过描述一种基因系统来检测酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）中直接的蛋白质-蛋白质相互作用，彻底改变了蛋白质相互作用分析[2]。Gal4有两个不同功能域即：N端DNA结合域（DNA-BD）和C端（转录）激活域（AD），两个单独的域均独立于另一个而维持其功能。在诱饵蛋白上加上BD结构域，在猎物蛋白上加上AD结构域，当诱饵和猎物结合时，BD和AD结构域在空间上相互接近，发挥转录因子的作用。……