易俊莉 杨新宇 张洁 田丽丽 丁北川 武文清

非结核分枝杆菌病与结核病临床表现相似，如未能及时准确鉴定极易造成误诊，且非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria，NTM)大多对常见的抗结核药品耐药，只采用常规抗结核药品进行治疗疗效大多不理想。因此，需要操作简便、快速、可靠的区分结核分枝杆菌复合群(MTBC)与NTM的检测方法。为此，笔者比较不同原理的3种方法[即：对硝基苯甲酸/噻吩-2-羧酸肼(PNB/TCH)生长试验法、结核分枝杆菌抗原(MPB64)检测法、PCR-荧光探针法]对MTBC和NTM的鉴定结果，分析其临床应用价值。

资料和方法

一、菌株来源

11株标准菌株包括MTB标准株H37Rv及10株 NTM标准株(堪萨斯分枝杆菌、戈登分枝杆菌、胞内分枝杆菌、鸟分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、溃疡分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、偶然分枝杆菌)均来源于国家结核病参比实验室。238株临床分离株为北京结核病控制研究所2019年1—12月门诊患者培养阳性冻存菌株，经涂片抗酸染色均为阳性。

二、检验方法

1.仪器与试剂：中性罗氏培养基及PNB/TCH培养基由河南赛诺特生物技术有限公司提供。结核分枝杆菌抗原(MPB64)检测试剂盒由杭州创新生物检控技术有限公司提供。PCR-荧光探针法使用Roche LightCycler480仪，试剂盒由成都博奥晶芯生物科技有限公司提供。微阵列基因芯片试剂盒、核酸提取仪、芯片杂交仪、芯片扫描仪由北京博奥生物有限公司提供。

2.菌株复活：从菌株冻存管中取0.1 ml菌液接种在中性罗氏培养基中，37 ℃孵育2～4周，每周观察生长情况，直至长出可视菌落。……