孟昭倩，段 然，吕东月，郭国侠，郭靓子，卜 戈

单核细胞增生李斯特菌(Listeriamonocytogenes，Lm)简称单增李斯特菌，属于李斯特菌属，为革兰阳性短小杆菌，广泛分布于自然界，是重要的食源性人兽共患病原菌之一[1]。可引起人和多种动物的胃肠炎、脑膜炎、败血症、流产等[2]。该菌环境耐受性较强，温度要求不高，0 ℃～45 ℃均能生存和繁殖。研究表明，李斯特菌病散发和暴发的重要原因是食入被Lm污染的食品[3]，主要感染者为免疫力低下的人群、孕妇和新生儿[4-5]，据报道新生儿感染该菌死亡率最高达56%[6]。为了解Lm的流行病学特性，本研究对阜阳市2014-2019年从食品和病人样本中分离的55株Lm进行毒力基因、MLST和PFGE分型分析，以建立Lm分子特征数据库，为本地单增李斯特菌病的预防控制提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1菌株来源 共55株Lm纳入本研究，其中3株病人菌株分别分离自早产孕妇的胎膜(胎死宫内)、早产婴儿的脑脊液、肝硬化败血症病人的血液；52株食品株分离于2014-2019年阜阳市食品安全风险监测样品，样品采集按照安徽省食品安全风险监测工作方案要求，采集于本市几个综合性超市、农贸市场、餐饮店的生畜肉、熟肉、沙拉和豆制品等。

1.1.2主要试剂和仪器 培养基(北京陆桥技术有限责任公司)、DNA提取试剂(江苏百世诺医疗科技有限公司)、限制性内切酶AscI(New England Biolabs)、毒力基因和管家基因引物合成于生工生物工程(上海)股份有限公司。全自动微生物鉴定仪VITEK2(法国梅里埃公司)、全自动核酸提取仪(台湾圆点奈米技术开发有限公司)、凝胶成像及脉冲场凝胶电泳系统(美国Bio-Rad公司)扩增仪、电泳仪(DYY-C6北京市六一仪器厂)。……