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福建省2012-2018年布鲁氏菌分离株的MLST分型

2021-01-06陈志平韩腾伟林代华周淑姮刘维俊肖方震邓艳琴

中国人兽共患病学报 2020年12期
关键词:研究

陈志平,韩腾伟,林代华,周淑姮,刘维俊,刘 菁,肖方震,邓艳琴

布鲁氏菌病(简称布病)是由布鲁氏菌属细菌引起的能造成机体全身性感染的人兽共患病。人感染后通常表现为发热、盗汗、乏力以及关节疼痛等症状,临床体征缺乏特异性[1],转化为慢性疾病后可反复发作、长期不愈[2];动物感染后则常导致流产和不孕,严重影响人群健康与畜牧业经济发展。近年来,我国布病发病率居高不下,发病数逐年递增,全国范围内报告布病病例从2005年的18 个省份发展到2016年的31 个省份,其中大部分病例聚集于北方省份如内蒙古、山西以及黑龙江等,南方地区主要为散发病例但也呈现递增状态[3],形势较为严峻。对布鲁氏菌的分子流行病学研究有助于布病疫区性质的鉴定,也有助于布病疫情的控制。本研究收集了福建省各设区市43 株布鲁氏菌菌株,以MLST方法为手段探索其种群结构及遗传进化关系。

1 材料与方法

1.1布鲁氏菌菌株 43株布鲁氏菌菌株分离自2012-2018年福建省各设区市布病病例,由福建省疾病预防控制中心收集或分离、鉴定与保存。

1.2实验仪器与试剂 实验仪器主要有电泳仪、电泳槽、CO2培养箱、冷冻高速离心机、梯度PCR仪、生物安全柜、凝胶成像仪等;试剂主要有布鲁氏菌培养基(BD)、单相特异性血清A/M、硫堇/碱性复红染料、PrimeSTAR Max DNA聚合酶、细菌基因组DNA提取试剂盒(QIAGEN)、DL2000 DNA Marker等,引物由生工生物工程股份有限公司合成。

1.3传统细菌学鉴定 根据菌落形态、染色、生长特性和布鲁氏菌诊断血清凝集试验对上述43株布鲁氏菌进行复核鉴定;……

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