马剑锋

(洛阳市涧西区疾病预防控制中心<传染病预防控制所>,河南 洛阳 471003)

肺结核是严重威胁人类生命健康的呼吸道传染性疾病,肺结核感染使机体的免疫能力减弱,免疫应答功能紊乱。在肺结核患病的早期进行诊断和治疗有利于患者康复,早期明确诊断、合理用药对改善肺结核患者的预后有意义[1-2]。因此,准确、可靠的诊断方法是关键[3]。笔者探讨细菌培养、涂片抗酸染色、荧光定量聚合酶链式反应(TB-PCR)与结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert MTB/RIF)检测肺结核的效能。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2018年3月至2019年3月洛阳市涧西区疾病预防控制中心收治的60例肺结核的患者,男38例,女22例;年龄30~70岁,平均(52.7±14.4)岁。患者病情符合肺结核诊断标准[2],无其他感染,无心、肺功能障碍。

1.2 方法

采集患者痰液样本,分别采用MTB培养法、涂片抗酸染色法、荧光定量聚合酶链式反应(TB-PCR)及结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF)检测MTB。

1.2.1 仪器与试剂 酸性改良罗氏培养基,分枝杆菌(Middlebrook 7H9)培养基干粉(美国Becton Dickinson公司),抗酸染色试剂盒(济南百博生物技术股份有限公司),结核分枝杆菌PCR扩增试剂盒(上海宏锦公司);荧光定量PCR仪(美国应用生物公司)。

1.2.2 样本检测 ①MTB培养法:痰液标本高速离心5 min,洗涤沉淀后,接种于培养管;每60 min使用荧光强度记忆探测器检测培养管中的荧光强度。②涂片抗酸染色法:样本涂抹于玻片正中央,晾干,滴加2滴石碳酸复红染色液,夹持玻片在酒精灯上加热5 min,冷却后,冷水冲洗;滴加3%盐酸酒精脱色1 min,晾干后,冷水冲洗;滴加碱性美兰溶液进行复染,1 min后,冷水冲洗,晾干后,滴加香柏油,显微镜观察。……