武胜科

[摘要]目的：研究微生物检验在流行性感冒病毒检测中的价值。方法：选取当地辖区医院2019年4月至2020年4月前来就诊的148例表现流行性感冒症状病人进行微生物检验。观察检验结果。结果：经检验共100例患者确诊，阳性率67.57%。结论：对流行性感冒患者进行微生物检验能有效检出病原体，该检验方式具有显著价值。

[关键词]微生物检验;流行性感冒;流感病毒

[中图分类号]R511.7;R446.5

[文献标识码]A

[文章编号]2096-5249（2021）24-0176-02

流行性感冒由流感病毒引起，该疾病在春季、冬季发病率较高。患者感染后表现出发热、肌肉酸痛、全身无力、咳嗽等症状[1]。患者感染后3至14天内可自愈，但也有重症病人生命受到威胁[2]。经微生物检验能够明确致病原因，为此本研究通过微生物检验技术进行检测，分析其价值。

1资料与方法

1.1一般资料选取当地辖区医院2019年4月至2020年4月前来就诊的148例表现流行性感冒症状病人为对象。男性70例，女性78例，年龄23-65岁，平均31.91±3.75岁。两组基本资料具有可比性（P>0.05）。

1.2方法采集148例疑似患者咽拭子、鼻拭子等样本，进行微生物检验。具体如下：（1）样本处理：1在病人症状早期或者恢复阶段采集血清样本。采集份数两份，样本置于冰壶中保存以待检测。48h内接种，若不能在规定时间内接种需将样本置于低温环境下保存。2生理盐水处理棉拭子，将其放置5min。采集漱液，用无菌烧杯保存。3样液充分震荡后在4°C条件下静置5至10min，使其沉淀。4样液沉淀后取3ml上清液于烧杯中，添加青霉素以及链霉素。在4°C条件下静置2h，准备接种。（2）培养：将病毒分离并进行培养。动物分离培养成本高，细胞、鸡胚培养是最常见方法。1鸡胚培养。将标本于羊膜腔、鸡胚尿囊腔中进行接种，接种前需选择日龄适当的接种物。孵育温度控制在35°C，时间为2至3天。每天翻卵观察孵育情况，频率2次/d，若鸡胚在2小时内死亡内死亡则应当放弃。孵育成功后收集羊水以及尿囊液，开展血凝试验。若实验结果为血凝阳性，利用特异性抗体开展抑制试验。通过抑制试验鉴别病毒的类型、亚型。若血凝试验结果为阴性，需要再一次在鸡胚中盲传。2细胞培养。将标本于传代狗、猴的肾细胞之以及原代人的胚肾中进行接种。于35°C条件下进行孵育，时间为10至14天。孵育期间每天观察培养情况，有无病变出现。若病变出现应当开展血凝试验。若无病变出现则将当每隔2小时进行检测。若孵育时间周期内依然无病变出现应当开展盲传一代。（3）病毒鉴定：在细胞聚集过程中，不同流行性感冒病毒经对其对应的红细胞敏感。利用特异性抗体对血凝试验为阳性结果的分离株进行抑制试验。鉴别病毒的类型、亚型。

1.3观察指标本研究观察指标为微生物检验结果。记录样本检出的阳性率，阳性率=阳性例数/总样本数*100%。

1.4统计方法SPSS17.0软件分析数据，率计数资料采用c2检验，并以率（%）表示，（P<0.05）表示数据差异明显，有统计学意义。

2结果

经检验共100例患者確诊，阳性率67.57%，具体结果如表1所示。

3讨论

流行性感冒在春冬季节较为常见，该疾病任何年龄皆可见，幼儿、体质薄弱者感染风险较高。流感易控制，治疗难度低，且多数病人可自愈，但重症流感对病人的生命健康有危险隐患[3]。学龄前儿童是重症流感危险人群，该疾病也是导致6个月以下婴儿死亡的原因之一。此外老年患者、合并基础疾病人群感染流感后病情加重，促进基础疾病的发展。Frederick等人[4]通过实验证实Alere试验、Liat试验均不能同时确保对甲流、乙流具有较高的敏感度，早期诊断有利于开展对症治疗。通过微生物检验能够明确致病原因，流行性感冒病毒感染是引起流行性感冒的重要原因，飞沫传播是流感病毒的主要传播方式。飞沫中携带流感病毒，而其在空气中能够生存约30分钟。当与病人处于同一环境或接触其私人物品后流感病毒会从口鼻、眼睛黏膜处经呼吸系统进入人体。流感病毒侵犯呼吸道黏膜的上皮细胞，因此病人在感染后会表现出呼吸道反应。

流感病毒分A、B、C三种类型，A型病毒容易引起抗原性发生变异，B型病毒低致病性，通常不会造成流感大面积的暴发，C型病毒抗原性稳定，不会造成流感大面积的暴发，但婴幼儿、免疫能力低下人群是患病高危人群[5]。流感病毒属于RNA病毒。其具有包膜大多数呈球形。新分离流感病毒形态也可表现为丝状。核心、基质蛋白以及外层包膜是病毒构成。核酸、核蛋白（NP）组成其核心。在其核心中存储了病毒信息遗传物、酶。病毒信息遗传物为单链RNA，其节段中能够编码结构、功能蛋白。A型、B型、C型流感病毒中前两种病毒的基因组可分成8个节段，而后者可分成7个节段。这一特征导致了病毒复制过程中发生基因重组的几率较高，易产生新病毒株。此外不同亚型的病毒对同一细胞的敏感性存在差异，因此在微生物检验的病毒分离培养环节中培养结果会受到影响。NP包裹病毒RNA的每一个节段，其作为病毒衣壳表现为对称的螺旋形状。患者被流感病毒感染后临床症状较多，以发热、畏寒、肌肉酸痛、头痛、咳嗽等症状为主。流感具有易传染、发病率、治疗难度低的特点。0至4°C条件下流行性感冒病毒存活时间较长，可达数周之久，为此春季、冬季为流感高发季。病毒在56°C条件下生存之间不超过30分钟，耐热性差，同时对紫外线较为敏感。而在-70°C的低温环境中流行性感冒病毒能够长期生存。患者在感染后症状表现的时间存在差异性，这是由于病人的免疫能力、身处环境以及侵入机体的病毒量影响潜伏期[6]。免疫能力低下的人群更容易患病且更容易表现出症状。病毒经呼吸道进入机体，会感染呼吸系统上皮细胞。在其进入机体后若免疫体系统不能及时分泌抑制物将其消灭将会引起细胞变形，使其进入临近细胞并产生子代病毒，因此临床中有部分病人肠粘膜遭受损伤。根据病人体质、病毒侵入量等潜伏期通常在1至4天，虽然流感疾病容易控制且治愈率高，但若发展为重症、危重症则将威胁生命，婴幼儿、慢性基础疾病、老年人等患病后风险更大。临床中有大量关于微生物检验技术检测流感病毒的研究，均证实该项技术的可靠性。韩志国等人[7]提出经微生物检验对病毒的分离培养的分离鉴定效果更好，该检测技术优于PCR核酸检测。同时通过微生物检验还能进行抗原性分析，为临床治疗提供了可靠的依据。邢军华团队[8]表明流感病人传染性强，容易从呼吸道侵入，经微生物检查能够快速确诊，对病人进行对症治疗。在邢军华团队研究中疑似病人经微生物检验阳性率高达67.86%。其团队证实了微生物检验的价值。须注意的是机体在感染流感病毒后的排毒时间约为5天，感染后的半天至1天内排毒量达到最高[9]。因此病人在出现流行性感冒症状后应当早期进行诊断采集样本，确保病毒存活率。同时采样时间与收样时间之间间隔过长会影响病毒的培养分离效果，因此医院在采样后应当及时培养，患者需要提高就诊意识尽早到院检查，提高诊断效率。

研究证实，对流行性感冒患者进行微生物检验能有效检出病原体，确保患者早期确诊，及时治疗，该检验方式具有显著价值。

参考文献

[1]赵佩娟，蔡宏津.流行性感冒的快速诊断检验[J].感染控制杂志，2019，29（1）：23-28.

[2]韩志国，薛娜，樊旭成，等.流行性感冒病毒细胞培养阳性相关影响因素分析[J].微生物学免疫学进展，2018，46（02）：56-59.

[3]王旭，马可佳，江云飞，等.流行性感冒病毒的微生物检验[J].中国卫生标准管理，2016，7（07）：157-158.

[4] Frederick， S， Nolte， et al. Direct Comparison of Alere i and cobas Liat Influenza A and B Tests for Rapid Detection of Influenza Virus Infection[J]. Journal of Clinical Microbiology， 2016， 54（1）： 2763- 2766.

[5]田鹤，张进强，郭家胤，等.2015年至2018年儿童流行性感冒样疾病的病毒病原学监测[J].中华传染病杂志，2020，38（08）：489-494.

[6] BruningAHL，LeeflangMMG，VosJMBW，etal.RapidTestsfor Influenza， Respiratory Syncytial Virus， and Other Respiratory Viruses： A Systematic Review and Meta-analysis[J]. Clinical Infectious Diseases An Official Publication of the Infectious Diseases Society of America， 2017， 8（6）： 6-6.

[7]劉述华.流行性感冒病毒的微生物检验[J].医学信息，2013，26（08）：521-521.

[8]邢军华，文蔚，尹明.流行性感冒病毒的微生物检验要点分析[J].中国继续医学教育，2020，12（19）：101-103.

[9]张丽杰，宋会荣.流行性感冒病毒的微生物检验要点分析[J].世界最新医学信息文摘，2019，19（02）：161+168.