陈玉婷 陶春梅 陈 倩 初晓丽 吴文诗

深圳市宝安区沙井人民医院(518104)

妊娠期糖尿病(GDM)临床经过复杂，可能对母婴生命安全均造成威胁，且部分孕妇产后仍存在糖代谢异常，远期心血管疾病发生风险倍增。明确GDM孕妇产后糖代谢异常影响因素并针对性干预，对增强产妇产后躯体健康、提高生活质量。miRNA参与多种疾病的发生发展，有研究发现与成人糖尿病相关[1-2]。目前关于微小RNA-375(miR-375)对GDM患者产后糖代谢异常的预测价值研究不多，本研究以此为切入点进行观察探讨、为GDM患者的早期糖代谢干预等提供新依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集2018年1月—2019年7月本院产前检查并分娩的GDM患者200例临床资料为GDM组，本人签署知情同意书。纳入标准：①符合有关指南中GDM诊断标准[3-5]；②年龄≥20周岁；③孕13周前建立孕检卡，孕前血糖正常，孕24～28周行75gOGTT诊断GDM；④临床资料完整、规律产检并配合产后随访。排除标准：①合并妊娠期高血压疾病等其他妊娠合并症；②合并基础性心肝肾功能不全、恶性肿瘤、自身免疫性疾病等可能对GDM干预及分娩结局等产生影响的疾患；③入组前3月内有糖皮质激素应用史；④不配合相关干预或随访脱落病例。取同期本院行产前检查且糖耐量检测正常的孕中期孕妇100例为对照组，各项检查结果均在正常范围内、年龄≥20岁且本人签署知情同意书。本院伦理委员会通过此次伦理审核。

1.2 miR-375检测

对入组孕妇抽取晨空腹静脉血行RNA抽提。设置逆转录条件为：16℃ 30min、42℃ 30min、85℃ 5min、4℃ 5min。设置聚合酶链反应(RT-PCR)条件为：95℃ 15s 45个循环、60℃ 60s。根据反应曲线得到Ct值，使用U6 SnRNA作为内参，按照公式2﹣△△Ct计算miR-375的相对表达量。

1.3 随访及临床资料收集

GDM组孕妇产后3月复查口服糖耐量试验(OGTT)并根据结果分为糖代谢正常组、糖代谢异常组。收集者临床资料，包括年龄、孕前体质指数、孕期增重、既往生育史、文化程度、居住地、生活习惯(吸烟、饮酒)、家族糖尿病史、孕期是否应用胰岛素、分娩后是否母乳喂养等。

1.4 统计学方法

使用SPSS20.0进行数据分析。两组计数资料比较采用卡方检验，计量资料比较采用独立样本t检验；logistics回归分析GDM患者产后糖代谢异常的危险因素；绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血miR-375表达水平对GDM患者产后糖代谢异常的预测价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料

GDM组，入组时孕周(25.5±2.0)周(24～27周)，体质指数(BMI)(24.9±2.1)kg/m2(23～27 kg/m2),孕(2.3±0.7)次(1～5次)，产(0.6±0.1)次(0～2次)；对照组，入组时孕周(25.6±1.9)周(24～28周)，体质指数(24.9±2.0)kg/m2(23～28 kg/m2)孕(2.3±0.8)次(1～4次)，产(0.6±0.1)次(0～2次)。两组孕妇资料比较无差异(P>0.05)。

2.2 外周血miR-375表达水平

GDM组外周血miR-375表达水平(0.61±0.09)高于对照组(0.40±0.07)(t=20.440，P=0.000)。且GDM组产后糖代谢正常与异常者，其孕前BMI、孕期增重、家族糖尿病史、miR-375水平等存在差异(P<0.05)，余临床指标未见差异(P>0.05)，具体见表1。

表1 GMD患者产后不同糖代谢者临床资料比较

2.3 GMD患者产后糖代谢异常影响因素分析

以GMD组患者产后糖代谢异常作为应变量(产后糖代谢异常=1，产后糖代谢正常=0)，选择表1中具有统计学差异的指标作为自变量。经logistics回归分析，孕前BMI较大、孕期增重较多、家族糖尿病史、miR-375表达水平较高等均是GDM患者发生产后糖代谢异常的危险因素(P<0.05)。见表2。

表2 GMD患者产后糖代谢异常影响因素的logistics回归分析

2.4 外周血miR-375对GDM患者产后糖代谢异常的预测效能

ROC曲线分析显示，孕中期GDM患者外周血miR-375对产后糖代谢异常预测的临界值为0.625，其时敏感度、特异度分别为64.0%、78.7%，AUC为0.760(95%CI 0.691～0.829)。见图1。

3 讨论

GDM孕妇产后大部分糖代谢恢复正常，一部分产妇可能存在糖代谢异常，远期发生糖尿病风险高。GDM孕妇产后糖代谢异常发生机制尚不明确，

图1 外周血miR-375水平对GDM患者产后糖代谢异常的预测效能

早期干预并影响最终结局是目前临床研究重点。Garcia[4]研究发现，miR-375在成年2型糖尿病患者血中存在异常表达，且与胰岛β细胞功能、胰岛素抵抗等相关；Higuchi[5]研究认为，机体循环中的miR-375可作为2型糖尿病的生物标志物。关于miR-375 与GDM关系目前研究不多，孙天虹[6]研究提及GDM孕妇外周血miR-375与正常孕妇相比出现上升趋势，但未提出上升对病情及预后的影响。本研究对比孕中期GDM组与对照组发现， GDM组外周血miR-375表达量增加，提示miR-375在GDM发生发展中发生一定作用。

为进一步明确miR-375对GDM孕妇产后糖代谢异常的影响，本文结合临床资料进行单因素分析，发现发生产后糖代谢异常的GDM孕妇其孕前BMI、孕期增重、miR-375表达水平较高，且多合并家族糖尿病史。进一步经logistics回归分析，孕前BMI较大、孕期增重较多、家族糖尿病史、miR-375表达水平等均是GDM患者发生产后糖代谢异常的危险因素。孕前BMI较大、孕期增重较多、家族糖尿病史对GDM发生的作用已多有研究[7-9]证实，且此类孕妇的GDM病情一般较重，可能导致胰岛功能严重受损并诱发产后糖代谢异常出现。

miR-375促使GDM孕妇产后糖代谢异常的机制不明，Li[10]在其2014年的研究中提出，miR-375通过调节Mtpn和Pdk1基因的表达并对胰岛素分泌产生影响，提示可能成为糖尿病治疗的潜在靶点，控制miR-375表达可帮助胰岛β细胞成熟。Yoshimatsu[11]研究认为，miR-375可能作为预测胰岛分离和移植后慢性胰腺炎患者胰岛产量和代谢功能的新的生物标志物。以上研究提示，miR-375在糖尿病及胰岛细胞中作用，可能与在GDM中具有共通性，miR-375高表达所致GDM病情严重、胰岛细胞破坏加剧，增加了产后胰岛细胞功能、胰岛素敏感性恢复的难度，但以上推测有待后续深入研究加以明确。

采用ROC分析miR-375水平预测GDM孕妇发生产后糖代谢异常价值，预测临界值为0.625，敏感性及特异性达到64.03%、78.69%。提示检测GDM孕妇孕中期miR-375水平，可对产后糖代谢异常发生有一定预测价值。综上所述，孕中期GDM孕妇外周血miR-375水平异常增高，对产后发生糖代谢异常有一定预测价值。而关于miR-375表达干预用于治疗GDM还有待临床深入研究。