地榆中活性成分及其抗肿瘤作用研究进展

2020-12-17宛春雷刘栋奇

广东蚕业 2020年4期

关键词：光度法药典骨髓

宛春雷　刘栋奇

地榆中活性成分及其抗肿瘤作用研究进展

宛春雷刘栋奇

（牡丹江师范学院黑龙江牡丹江157000）

文章通过检索国内外有关地榆的研究文献，综述了地榆的化学成分与药理活性，总结了其活性成分的抗肿瘤作用。研究证明地榆具有一定的抗肿瘤作用，这为进一步开发并将其应用于临床治疗肿瘤的新药提供了参考。

地榆；鞣质；抗肿瘤

地榆为蔷薇科植物地榆或长叶地榆的干燥根，由于地榆具有抗寒、耐旱、喜光等适应性较强的特点，所以其主要生长在山坡草地或灌丛中，其海拔在30～3 000 m左右的地区[1]。地榆性苦，味酸、涩，微寒。归肝、大肠经。传统医家多利用其能解毒敛疮和止血凉血的功效，用来治疗血热出血症[2]。

地榆中的组分复杂，其有效成分主要有鞣质、黄酮和三萜皂苷类化合物，其中鞣质的成分活性较强，研究也较深入，地榆中鞣质不仅对心血管疾病有疗效，还在抗肿瘤、抗免疫缺陷、提高免疫力、改善肝肾功能等方面有一定的作用，尤其是在抗肿瘤领域，有很大的研发空间，文章主要对地榆中鞣质的性质及其抗肿瘤作用进行归纳总结。

1 鞣质提取分离及含量测定

鞣质又称单宁（Tannins），是存在于自然界的一类比较复杂的多元酚类化合物，其提取方法多种多样，经典的提取方法是溶剂提取法，其他提取方法如超声波法、微波法、超临界流体萃取、膜分离、半仿生等也大大提高了提取效率和纯度，为鞣质类成分进一步分离和纯化提供了良好的基础[3-4]。而鞣质的分离方法也多种多样，包括分级沉淀法、活性炭吸附法、大孔树脂吸附法、膜分离法、离子交换法等。

鞣质的经典含量测定方法有很多种，如重量法、容量法、比色法等。较常用的方法有皮粉法、高锰酸钾法、干酪素法、络合量法。紫外-可见光光度法较重量法具有操作简便、成本低廉、无化学试剂伤害等优点，且该测定方法方便实用，由于鞣质在760 nm左右有较强吸收，故其精密度较高，目前最常用的方法就是以没食子酸为对照品，利用紫外分光光度法测定鞣质的含量，《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）2020 版第四部采用的方法就是紫外分光光度法[5]。另外，以没食子酸为对照品利用高效液相色谱法测定其鞣质含量准确度和精密度更高[6-7]。

2 地榆鞣质

2.1 地榆中鞣质的含量

地榆内部包含缩合和可水解两种鞣质。可水解鞣质根据构成酸的不同，又分为有没食子酸鞣质和逆没食子酸鞣质类两种，经过水解就会分解为酸和糖。地榆中的主要活性成分就是鞣质，故地榆中鞣质的含量也是评价地榆质量高低的标准。对于地榆中鞣质含量的测定，早在20世纪90年代竺叶青等利用高锰酸钾法来测定地榆中鞣质的含量，测得3种地榆种鞣质的平均含量为9.13 %，此种方法同皮粉法相似，但是误差较大[8]；王坤参照《欧洲药典》和《中国药典》中记录的测定鞣质含量的方法，用水做溶剂采用浸渍法进行提取，采用磷钼钨酸-干酪素比色法，以没食子酸为对照测定地榆中不同产地鞣质的平均含量为11.16 %[9]；姜贵全以两种提取溶剂乙醇和丙酮作为地榆鞣质的提取溶剂，考察了提取溶剂的浓度、药材粒度、提取时间，料液比、回流次数等因素，最终确定60.00 %的乙醇作为提取溶剂，用紫外分光光度法来测定地榆中总鞣质含量为8.85 %[10]；陈斯玮利用中国药典的分析方法紫外分光光度法中的磷钼钨酸-碳酸钠比色法得到的鞣质的提取率为15.50 %[11]；徐佳丽以没食子酸为对照品，用HPLC法测定其含量，其方法较紫外分光光度法比准确度和精确度都进一步提高，测得的没食子酸含量为（3.71 ±0.34 ）%[7]；武晓丹和宛春雷、郑莹、刘畅[12 -15 ]选择用8倍量的丙酮-水70 %复合溶剂作为提取溶剂提取不同中药中的鞣质，以上就是鞣质含量测定的方法，地榆中鞣质的提取方法选用溶剂提取法，溶剂通常选择水、乙醇和丙酮，鞣质含量测定的方法主要还是以《中国药典》收录的紫外分光光度法，各个产地地榆根部的总鞣质的含量平均值在10.00 %左右。

在鞣质的提取和含量测定的众多方法中，皮粉法被收录于英国药典，应用较广泛，但是选择性差、准确性低；干酪素法优于皮粉法，在鞣质的含量测定中也多有应用；而紫外分光光度法专属性强、操作简单、灵敏度高、故其早被收录于《中国药典》的第四部之中。

2.2 地榆鞣质的抗肿瘤作用

近十年来全国恶性肿瘤发病约300万人，死亡占居民全部死因的23.91 ％，对抗肿瘤药物的研究始终是人类所面临的难题。随着人们对鞣质分离、纯化技术的提高，已经阐明了大量裸质单体分子结构，为单体成分抗肿瘤作用的研究提供了保证。初步揭示了鞣质分子结构与抗肿瘤作用的构效关系。Kashiwada等用体外细胞培养方法观察不同种类鞣质对肿瘤细胞株的毒性影响。以半数有效剂量（ED30）表示抗肿瘤作用。实验显示，没食子酰鞣质中部分含有奎尼酸核的鞣质有一定的抗肿瘤作用[16 ]。胡毅利用MTT法及流式细胞仪分析法分析地榆鞣质对人肝癌SMMC-7721细胞的作用，并用光镜和电镜进行观察，结果显示经地榆鞣质作用后，其对肝癌细胞SMMC-7721有明显的抑制作用，为地榆鞣质应用于临床提供了依据[17-18]。宛春雷考察了地榆鞣质成分对人肝癌细胞株HepG2的作用，结果显示其地榆中鞣质成分以浓度依赖性方式使肝癌细胞株HepG2的增殖受到抑制并促使其凋亡[19]。由以上研究可知，地榆中鞣质成分对肝癌细胞有一定的抑制作用，未来可以为其在治疗肝癌的研究中提供临床依据。

据相关数据的统计，患者在肿瘤放、化疗过程中均会出现骨髓抑制的现象，从而导致出现白细胞减少症，临床常出现严重的感染和出血。如能在肿瘤放、化疗过程中，保护骨髓造血功能、使白细胞数升高，将会大大提高放、化疗药物的有效性。因为骨髓抑制的最突出表现就是白细胞减少，低于正常值，这样会降低人体免疫力，临床会出现感染和出血，故治疗肿瘤放、化疗过程中所引起的骨髓造血功能抑制，保护骨髓造血功能，升高白细胞才是关键。

杨金辉研究了地榆鞣质对环磷酰胺致白细胞减少症的影响，结果显示其的升高白细胞数量和骨髓DNA含量具有显著作用[20]。熊永爱也做了类似的相关研究，其结果也表明地榆鞣质能显著拮抗小鼠的骨髓抑制[21 ]。

在临床方面，地榆升白片已被证实在抗肿瘤的过程中，是不可或缺的辅助用药，其在预防与治疗放、化疗引起骨髓抑制方面具有一定的疗效，该药在肿瘤放、化疗期间使用有较高的临床价值。经苏柘僮关于白细胞减少症的研究中得出地榆升白片的物质基础以地榆鞣质为主，故地榆升白片在肿瘤治疗的过程中的辅助作用亦可看作是地榆鞣质的功效。经丰富的临床经验证明：地榆升白片可以提高肺癌[22-23]、胃癌[24]、宫颈[25-26]、白血病[27]、结肠癌[28]等常见癌症都有增加白细胞数量，恢复外周血象，提高血小板数量、改善临床症状。

3 讨论

通过查阅地榆鞣质的提取、分离及其抗肿瘤作用和治疗肿瘤作用的相关文献发现，地榆中的鞣质的含量均值在10.00 %以上，其含量测定的方法以紫外分光光度法为主，地榆鞣质通过抑制肿瘤细胞的增值率，促进肿瘤细胞内ROS等机制抑制肿瘤细胞生长，而以地榆鞣质作为药效物质基础的地榆升白片可以显著增高肿瘤患者的白细胞数，在临床治疗各种类型的恶性肿瘤过程中都起到了重要的作用。

[1]唐霄铧,李臻,白为,等.地榆研究进展[J].安徽农业科学,2015,43(28):1-3.

[2]朱永红,吕盼.民族药紫地榆研究进展[J].云南中医学院学报,2012,35(3):20-22.

[3]王红,陈秀秀,刘军海.单宁的提取纯化技术研究进展[J].辽宁化工,2011,40(8):864-866.

[4]易庆平,许开华,郭苗苗,等.植物单宁材料吸附贵金属的研究进展[J].贵金属,2018,39(4):90-98.

[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典[Z].2020.

[6]骆婷婷,蓝海,张海珠,等.紫地榆中总鞣质的含量测定[J].大理学院学报,2014,13(2):12-14.

[7]徐佳丽,苏柘僮,陈龙,等.HPLC测定地榆鞣质提取物中游离没食子酸的含量[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(20):84-86.

[8]竺叶青,施大文,李自力,等.中药地榆的薄层层析鉴别及鞣质含量测定[J].上海医科大学学报,1995(2):149-150.

[9]王坤,鲁静.中药材中鞣质含量测定方法的研究[J].中国药事,2004(6):33-36.

[10]姜贵全.地榆中药用活性成分提取工艺及稳定性研究[D].哈尔滨:东北林业大学,2005.

[11]陈斯玮.地榆中鞣质含量的测定[J].安徽农业科学,2012,40(13):7711-7712.

[12]郑莹.荨麻中鞣质的含量及其抗肿瘤抗氧化药理作用研究[D].哈尔滨:哈尔滨商业大学,2015.