陈圆，杨云乐，冯丽，李萌(南京医科大学附属儿童医院输血科，南京210008)

正常情况下，ABO血型IgM抗体在出生前尚未产生，在出生后几个月内逐渐形成。因此，婴幼儿血型鉴定中易出现反定型不凝集或凝集很弱等现象,给临床血型鉴定及输血工作带来一定困扰[1-2]。了解ABO血型IgM抗体发育情况及趋势，有利于帮助临床正确鉴定血型，确保用血安全。

1 对象与方法

1.1研究对象 2019年9月至2020年3月共收集本院18月龄内除早产儿及免疫病患儿1 250例，其中A型454例，B型410例，O型386例，AB型除外。按年龄分为5组，分别为≤30天组，2～3月组，4～6月组，7～12月组，13～18月组。

1.2试剂来源 微柱凝胶血型鉴定卡、抗人球蛋白检测卡、低离子液(美国伯乐公司)；血型鉴定及不规则抗体筛查质控品(北京金豪制药公司)；单克隆抗A、抗B标准血清，标准 A 型、B 型和 O 型红细胞悬液(上海血液生物技术公司)。

1.3实验方法

1.3.1ABO血型鉴定及不规则抗体筛查 严格按照质控品说明书进行室内质控，采用微柱凝胶法鉴定ABO血型并记录反应格局，所有采集标本不规则抗体筛查结果均要求为阴性。

1.3.2效价测定 采用盐水试管法测定每份标本血浆中IgM抗体效价，并记录各稀释管的凝集反应强度；O型分别测定IgM 抗A、抗B。

1.3.3凝集度积分 对每份标本效价测定中的凝集强度进行评分并计算总和，定为该标本的凝集度积分。评分标准为：凝集强度4+记12分；3+记10分；2+记8分；+记5分；±记3分；-记0分。

2 结果

2.1ABO血型IgM抗体效价结果 见表1、2。30日龄内婴幼儿抗A、抗B抗体效价为0分别占33.88%、47.46%，提示该阶段婴幼儿抗体未发育或刚开始发育；2～6月龄婴幼儿抗A、抗B抗体效价为0的占比逐渐降低，提示该阶段婴幼儿IgM抗体迅速发育。7～12月龄组，抗A抗体效价均≥2，提示IgM抗A基本发育完成，抗B发育稍慢，但接近95%的婴幼儿已达到≥2。13月龄后，婴幼儿的抗A、抗B效价均≥2，95%以上抗A、70%以上抗B效价可达到≥16，提示IgM抗体发育已基本完成。

表1 ≤18月龄婴幼儿检出不同效价IgM抗A的百分比[n(%)]

表2 ≤18月龄婴幼儿检出不同效价IgM抗B的百分比[n(%)]

2.2ABO血型IgM抗体凝集度积分 见图1、2。随婴幼儿月龄增长，高凝集度积分标本占比逐渐增高，同月龄段抗B的凝集度积分略低于抗A，凝集度积分更适合同效价抗体凝集能力的比较。

图1 IgM抗A不同凝集强度积分段的百分比

图2 IgM抗B不同凝集强度积分段的百分比

3 讨论

血型抗体发育受自身因素和外界因素等多方面影响，临床工作中发现周岁婴幼儿IgM抗体仍存在较弱的情况，故本研究选择18个月内婴幼儿作为研究对象，旨在了解南京地区婴幼儿血型IgM抗体发育情况，了解抗体发育趋势。研究表明，肠道菌群[3]及营养给予方式[4]均能影响IgM 抗体发育水平，且对抗B发育影响更为明显。本研究中30日龄内的抗 A、抗 B效价≥1的标本占比分别为66.12%和52.54%，与徐秀云等[5]报道的抗体检出率数据接近。本研究结果与北京地区[6]较为相似，表明经济、饮食和环境等因素可能在ABO血型抗体发育中存在重要影响，或可促进抗体发育。

以往的研究一般只做抗体检出率分析，本研究测定了每份标本的效价，并采用凝集度积分的方法进行分析。实验过程中发现在相同效价下，各倍比稀释管的凝集强度也不尽相同，特别是微柱凝胶法反定型呈双群的标本，更容易出现同效价下凝集度积分较低的情况，表明抗体的凝集能力存在差异，因此采用凝集度积分的方法能更加全面体现ABO血型系统抗体发育情况。

婴幼儿血型IgG抗体可能存在母体影响，无法真实反映婴幼儿自身抗体发育，所以本研究观察的是血型IgM抗体。本研究还关注到新生儿ABO血型抗原存在弱表达现象，糖基转移酶的活性减弱或基因缺失可导致抗原表达异常，新生儿血型抗原与抗体发育过程是否也与糖基转移酶的活性有关，我们将做进一步研究。