王秋艳，张志刚，刘光辉

（1.新野县动物疫病预防控制中心，河南新野 473500；2.河南省农业农村厅，河南郑州 450008；3.河南省动物疫病预防控制中心，河南郑州 450008）

禽流感（avian influenza，AI）是由A 型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）引起的一种高度接触性、急性传染病。近年来，高致病性禽流感（HPAI）给养禽业造成的经济损失巨大。为有效防控HPAI，我国采取强制免疫政策。重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12 株，H7N9 H7 Re-2 株）是在我国广泛应用的疫苗。河南省从2019 年开始使用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗进行免疫。为评价重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗免疫鸡群的临床使用效果，2019 年7—12 月在河南省进行了临床效果调查和免疫抗体检测，以期为全国高致病性禽流感疫苗的使用提供参考。

1 材料与方法

1.1 临床效果调查

1.1.1 调查范围 在河南全省范围内，选取104个涉农县辖区内使用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗（H5N1 Re-11 株+Re-12 株，H7N9 H7 Re-2 株）免疫的940 个存栏500 只以上的养鸡场。

1.1.2 调查方法 采取现场调查与问卷调查相结合的方式。现场查阅养鸡场相关生产记录和疫苗使用记录等资料，向养鸡场兽医技术人员询问有关养殖场基本情况、生产情况、疫病防控情况、禽流感疫苗使用情况、疫苗使用效果、疫苗有效性评价，并填写调查问卷。问卷内容主要包括，养鸡场基本情况、禽流感疫苗使用情况、疫苗使用效果、疫苗有效性评价等。对疫苗有效性评价分为“好”“一般”“差”3 个等级：疫苗免疫后抗体水平较高、无不良反应为“好”；疫苗免疫后抗体水平高、出现不良反应为“一般”；疫苗免疫后抗体水平低、出现严重死亡为“差”。

1.2 H5 和H7 亚型免疫抗体检测

1.2.1 样品来源 全血样品来自328 个使用重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗免疫的养鸡场，在免疫后28 d 左右采集。按照《河南省农业农村厅关于印发＜2019 年河南省动物疫病监测与流行病学调查计划＞的通知》要求和抽样比例，每场采集30 份全血样品，共分离血清9 655 份。

1.2.2 检测及结果判定 依据《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936—2003），采用HA 和HI 试验，对H5 和H7 亚型免疫抗体进行检测和结果判定。HI 抗体滴度达≥24为免疫抗体合格，群体阳性率≥70%为合格。

2 结果与分析

2.1 临床效果

全省政府招标的重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗生产企业共有6 家。被调查的940 个养鸡场，共计免疫鸡3 308 335 只。免疫后1 周内出现不良反应的养鸡场共190 个，占20.21%，有3 754 鸡只出现不良反应，占0.11%；出现发病的养鸡场共140 个，占14.89%，有2 975 鸡只发病，占0.09%；出现死亡的养鸡场共51 个，占5.43%，有1 360 鸡只死亡，占0.04%。详细结果见表1。

由表1 可见：6 家企业生产的三价灭活疫苗在免疫后1 周内均出现一定比例的不良反应（0.11%）以及极低的发病率（0.09%）和死亡率（0.04%）。不同企业疫苗有一定差异：甲、丁企业疫苗免疫后的不良反应率较低（0.08%），而丙企业较高（0.36%）；丁企业疫苗免疫后的鸡只发病率最低（0.07%），而己企业较高（0.14%）；丁企业疫苗免疫后的鸡只死亡率最低（0.03%），但戊、己企业较高（0.06%）。

表1 疫苗临床应用效果

在被调查的940 个养鸡场中，除95 个未反馈评价结果外，其余845 个对所使用的重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗进行了总体评价。其中：评价“好”的649 个，占76.81%；评价“一般”的196 个，占23.19%；评价“差”的无。

2.2 免疫抗体检测

共检测328 个养鸡场，其中对9 655 份鸡血清样品进行了H5 亚型Re-11 株抗体检测，检出免疫合格场320 个，场群合格率为97.56%，检出免疫抗体阳性样品9 095 份，个体免疫抗体阳性率为94.20%；对9 616 份鸡血清样品进行了H5 亚型Re-12 株抗体检测，检出免疫合格场316 个，场群合格率为96.34%，检出免疫抗体阳性样品8 914 份，个体免疫抗体阳性率为92.70%；对9 655 份鸡血清样品进行了H7 亚型Re-2 株抗体检测，检出免疫合格场322 个，场群合格率为98.17%，检出免疫抗体阳性样品9 140 份，个体免疫抗体阳性率为94.67%。6 家生产企业疫苗的场群合格率和个体免疫抗体阳性率均超过了90%。详细结果见表2～3。

3 讨论

3.1 临床效果

6 家企业生产的疫苗在免疫后1 周内均会出现较低水平的不良反应以及发病和死亡情况。分析原因：一是鸡只本身的问题。鸡只可能受母源抗体、药物、潜伏感染等因素影响，经免疫接种后，仍不具备足够抵抗感染的能力，因而出现不良反应，甚至发病和死亡；不同品种鸡群对疫苗的免疫应答也不同。二是疫苗本身的问题。因为不同厂家的疫苗存在抗原含量、生产工艺、免疫佐剂以及保存运输等方面的不同，所以会导致一些差异。三是环境和养鸡场管理的问题。疫苗使用操作不当、接种不规范、生物安全措施不到位、饲养环境差、空气污浊、气温过高或过低等均是导致免疫后出现应激反应、应激发病和应激死亡的诱因。因此，在做好抗体监测、保障群体抗体水平良好的同时，还应当注重养殖的其他重要环节，建立有效的综合防控体系，同时结合品种、环境卫生状况、季节和气温、免疫接种次数等进行综合分析。

表2 不同企业疫苗的场群免疫检测结果

表3 不同企业疫苗的个体免疫检测结果

3.2 免疫效果

从检测结果看，群体免疫抗体阳性率均在88%以上，显著高于规定的最低标准70%，说明6 家企业生产疫苗的免疫保护效果较好。但仍有个别养鸡场的群体阳性率不合格，需要加强免疫，查找原因，及时补免。这也说明定期开展禽流感流行病学调查和疫苗免疫效果评估具有重要的临床指导意义。

4 结论

940 个养鸡场的重组禽流感病毒（H5+H7）三价灭活疫苗临床效果评价结果表明，6 家企业生产疫苗的鸡群临床应用效果较好，平均场群免疫合格率和个体免疫抗体阳性率均超过了90%，达到了较高水平。不良反应率以及发病率和死亡率极低。但在免疫过程中，应尽量消除影响疫苗临床效果的不利因素，定期开展免疫效果监测，及时调整免疫程序。