古丽努尔·买买提,谢小东,热依兰·阿不力米提

新疆维吾尔自治区人民医院，乌鲁木齐830001

干眼是泪腺分泌不足、泪液质量异常或泪液蒸发过多等引起的泪膜和眼表疾病，症状表现为眼睛不适、视觉障碍和泪膜不稳定等，严重影响患者日常生活及睡眠[1，2]。研究表明，干眼是与多种自身免疫性疾病相关的炎症疾病，减轻炎症和恢复正常的泪膜是目前治疗干眼最有效的方法[3]。白细胞介素1β(IL-1β)为常见炎症因子，基质金属蛋白酶2(MMP-2)在角膜炎症及新生血管形成过程中起促进作用[4]，维生素D的活性物质25-羟基维生素D[25(OH)D]具有广泛的免疫调节作用。基于此，本研究检测了干眼患者血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平变化，并分析其与干眼患者病情的关系，旨在为临床治疗本病提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 经新疆维吾尔自治区人民医院医学伦理委员会批准，选取2019年2月～2020年1月我院眼科门诊干眼患者。纳入标准：①符合美国眼科学会制定的干眼诊断标准[5]；②认知功能良好，无沟通交流障碍；③无沙眼、青光眼、白内障等眼部疾病；④凝血功能正常；⑤患者及家属知晓本研究，已签署同意书。排除标准：①合并其他部位严重感染性疾病；②合并重要器官功能障碍；③妊娠或哺乳期；④近期有眼部手术史；⑤合并恶性肿瘤或传染性疾病。共收集患者62例(观察组)，另随机选取62例健康体检者作为对照组。观察组男26例、女36例，年龄(51.26±5.62)岁，体质量(64.71±9.85)kg，近视30例，饮酒40例，吸烟35例，合并高血压12例、糖尿病6例、冠心病9例；对照组男22例、女40例，年龄(50.18±6.58)岁，体质量(62.95±9.47)kg，近视27例，饮酒44例，吸烟31例，合并高血压8例、糖尿病4例、冠心病5例。两组性别、年龄等基本资料具有可比性。

1.2 血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D检测方法 入组第2天清晨，采集受检者空腹静脉血3 mL，离心后取血清冷藏待检。采用8050型三重四级杆串联质谱仪以液相色谱-串联质谱法检测血清25(OH)D，试剂盒购自德国欧蒙医学实验诊断有限公司。采用MR-96T型酶标仪以ELISA法测定血清MMP-2、IL-1β，试剂盒购自北京方程生物科技有限公司。观察组以所测数值平均数为界值，高于此值为高水平、低于此值为低水平。

1.3 干眼患者病情评价方法

1.3.1 泪膜破裂时间 取10 g/L荧光素钠溶液5 μL，滴入受检者结膜囊内，采用裂隙灯下钴蓝滤光片观察；指导患者做3～4次眨眼动作，计算自最后一次眨眼后自然睁眼平视至角膜出现第1个干燥斑的时间；测量3次，取平均值。

1.3.2 眼表疾病指数(OSDI) 采用OSDI[6]问卷评估，共12个项目，每项0～4分。OSDI评分=总分/所答项目数×25，分值范围0～100分，得分越高表示眼表疾病越严重。

1.3.3 主观症状评分 包括畏光、眼痒、眼红、视疲劳、视力波动、眼异物感、干涩感等10项症状，每项无症状计0分、症状存在计1分；总分0～10分，分值越高表示症状越严重。

2 结果

2.1 两组血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平比较 见表1。

表1 两组血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平比较

2.2 血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D不同水平干眼患者病情评价指标比较 见表2。

表2 血清不同IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平干眼患者病情评价指标比较

2.3 干眼患者血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平的相关性 干眼患者血清IL-1β、MMP-2与25(OH)D均呈负相关(r分别为-0.441、-0.591，P均<0.01)。

2.4 血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平与干眼患者病情评价指标的关系 相关性分析显示，干眼患者血清IL-1β、MMP-2与泪膜破裂时间呈负相关，与眼表疾病指数、主观症状评分呈正相关(P均<0.01)；血清25(OH)D与泪膜破裂时间呈正相关，与眼表疾病指数、主观症状评分呈负相关(P均<0.01)。见表3。Logistic多因素回归分析显示，血清IL-1β(OR=8.000，95%CI5.348～11.967，P<0.05)、MMP-2(OR=5.313，95%CI3.145～8.975，P<0.05)高水平为干眼发生的危险因素，血清25(OH)D高水平(OR=0.782，95%CI0.628～0.974，P<0.05)为保护因素(P<0.05)。

表3 血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平与干眼患者病情评价指标的相关性

3 讨论

相关调查显示，人群中有5%～34%患有干眼，且发病率随年龄增长而显著增加[7]。干眼通常与保护角膜表面的泪膜不稳定有关，对眼表面具有潜在性损伤，病情由轻到重持续发展。因此，积极探索引起干眼的原因，针对病因进行治疗无疑是干眼治疗的关键，也是目前研究的重点之一[8]。

本研究发现，干眼患者血清IL-1β水显高于健康人群，提示血清IL-1β可能参与干眼的发生发展。IL-1β为体液中常见炎症因子，可参与免疫调节、促进炎症反应进展。正常生理状态下，IL-1β在体液中水平较低；当机体发生炎症时，IL-1β分泌量增加，能激活单核细胞和中性粒细胞促进白细胞聚集，诱发机体产生一系列炎症反应[9]，而炎症反应已被证实是干眼发生的重要因素之一[10]。本研究显示，血清IL-1β为干眼发生的危险因素，且与干眼患者OSDI、主观症状评分呈正相关关系，与泪膜破裂时间呈负相关关系。血清IL-1β水平升高，提示机体炎症反应增强，对泪膜的损伤增加，同时能加重机体免疫功能失衡，从而促进干眼的发生和进展。

本研究结果还发现，干眼患者血清MMP-2水平异常升高。MMP-2是一种结构和功能相关的能够降解细胞外基质的锌依赖性内肽酶，其主要作用之一是降解Ⅳ型胶原，而Ⅳ型胶原是人巩膜基底膜结构的主要成分。MMP-2水平增加可减少人巩膜基底膜结构型胶原含量，导致眼基底膜发生病理变化，角膜上皮屏障被破坏，眼表微环境改变，从而促进干眼的发生发展[11]。Wang等[12]研究发现，下调MMP-2、MMP-9等可升高泪腺组织损害因子的表达水平，可促进部分泪腺组织的分泌功能恢复。曹时燕等[13]报道显示，通过有效措施抑制干眼患者血清MMP-2表达，有助于减轻角膜炎症，抑制新血管生成，从而促进治疗效果改善。因此，本研究得出血清MMP-2为干眼发生的危险因素，且与泪膜破裂时间、OSDI、主观症状评分相关，以上述研究均提示血清MMP-2在干眼疾病进展中具有重要作用。

近年来研究发现，干眼的发生受多种因素影响，其中维生素D缺乏可能增加干眼发生风险。维生素D是一种脂溶性维生素，于阳光暴露下产生，具有调节体内钙和磷酸盐代谢平衡的作用，在角膜上皮细胞和免疫细胞等均有维生素D受体表达[14]。Kim等[15]研究指出，血清25(OH)D低水平和阳光照射不足与韩国成年人的干眼发生相关。本研究发现，干眼患者血清25(OH)D水平低于健康人群，与Meng等[16]研究结果一致；且本研究发现，血清25(OH)D与患者泪膜破裂时间呈正相关，与OSDI、主观症状评分呈负相关，提示随着血清25(OH)D水平下降患者症状逐渐加重。维生素D具有广泛的免疫调节作用，且维生素D具有抑制炎症细胞因子如TNF、IL-1等的能力。然而，目前有研究认为干眼是由于眼部表面细胞中先天性炎症途径的激活以及T辅助细胞产生的细胞因子引起的炎症性疾病。本研究亦显示，干眼患者血清IL-1β、MMP-2与25(OH)D均呈负相关。血清25(OH)D水平下降提示机体内维生素D含量减少，其免疫调节作用降低，从而促进干眼症状进展。但是，血清25(OH)D水平易受炎症等多种因素影响，本研究未能排除炎症反应对血清25(OH)D水平造成的干扰，可能存在一定误差，有待后续工作中排除病理以外的因素干扰。

综上所述，血清IL-1β、MMP-2、25(OH)D水平异常均与干眼发生发展密切相关，且与患者泪膜破裂时间、OSDI、主观症状评分存在良好线性关系，检测上述指标有助于评估患者病情，开展针对性治疗。今后我们准备进一步明确各指标作为治疗靶点的可行性，以期为干眼的预防和治疗提供新方法。