■肖再利 谭清甜，2 陈家烙 Daniel Sindaye 卢亚萍 邓百川*

（1.华南农业大学动物科学学院，广东广州510642；2.清远市广生元畜牧发展有限公司，广东清远511500；3.杭州市康源饲料科技有限公司，浙江杭州310051）

溶菌酶又称为胞壁质酶，是一种在人和动物机体中广泛存在的酶[1]，它能够分解细菌细胞壁肽聚糖层结构中的β-1，4 糖苷键，从而破坏细胞壁骨架，导致细菌死亡[2-3]，因而在抗菌方面尤其是抑制革兰氏阳性细菌中发挥着重要作用。有研究报道，溶菌酶还能够增强机体抵抗力和促进肠道有益菌的繁殖[4]，尤其是具有对人类和畜禽无毒副作用和无药害残留等优点[5]，因而得到了相关从业者的密切关注[6]。例如，美国农业部研究中心研究发现在猪饲粮中添加溶菌酶可有效改善猪的生长性能[7]，Ma等[8]和宋忠柯[9]分别在21 日龄断奶仔猪和肉雏鸡饲粮中添加溶菌酶发现显著提高了饲料转化率。杨荣芳[10]报道，添加溶菌酶可显著提高蛋鸡的产蛋率和平均蛋重水平，这些研究均表明溶菌酶可作为新型饲料添加剂应用到畜禽生产中。但目前为止，溶菌酶在蛋鸡上的相关报道较少。因此，本试验旨在探究饲粮中添加溶菌酶对产蛋高峰期蛋鸡的生产性能、蛋品质和血清生化指标的影响，确定溶菌酶的适宜添加水平，为溶菌酶在蛋鸡生产上的应用提供一定的科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

本试验所使用的溶菌酶，通过基因工程和液体发酵工艺获得，溶菌酶纯度约10%，酶活力为3 110 U/mg，由浙江艾杰斯生物科技有限公司提供。

1.2 试验设计及饲粮组成

试验采用单因子随机设计，选取360只产蛋率和体重相近的40 周龄京粉1 号蛋鸡，随机分成4 组，每组6 个重复，每个重复15 只鸡。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加200、350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶。预试期7 d，正式试验期28 d。基础饲粮为参照NRC（1994）需要配制的粉状配合饲料，其基础饲粮组成及营养水平如表1 所示。试验地点为清远广生元畜牧发展有限公司的蛋鸡养殖基地。

1.3 饲养管理

试验鸡舍为半开放式鸡舍，3 层阶梯式笼养，3 只/笼。每天喂料两次（7:00、15:30），自由采食和饮水，15:00 准时收集鸡蛋。试验期间舍内温度为23～30 ℃，自然通风结合纵向负压通风，舍内每天光照15 h，主要采用自然光照，早晚为人工光照，每天清理粪便1次，匀料3次，常规免疫，每3 d进行禽舍消毒1次。

表1 基础饲粮组成及营养水平（干物质基础）

1.4 指标测定与方法

1.4.1 生产性能

试验期间每天以重复为单位记录喂料量、产蛋数量和产蛋总重，每周末进行结料，计算产蛋率、平均日采食量、料蛋比、平均日产蛋量和平均蛋重。

1.4.2 蛋品质

正式试验第28 d，每重复取10枚外形完好、大小基本一致的鸡蛋用于蛋品质检测。依次使用游标卡尺、蛋壳强度测定仪（Egg Force Reader，Orka Technology Ltd.）、蛋品质分析仪(Egg NnalyzerTM，Orka Technology Ltd.)和螺旋测微仪测定蛋形指数、蛋壳强度、蛋黄颜色和哈氏单位等指标；每重复随机取2枚鸡蛋的蛋黄样，使用比色皂化法[11]测定蛋黄胆固醇含量。

1.4.3 血清生化指标

正式试验第28 d，每个重复随机选择2 只鸡，空腹12 h 后翅静脉采血各4 ml 左右，待血清析出后3 000 r/min 离心10 min，分装的血清样于-80 ℃保存。血清尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、谷丙转氨酶（ALT)、谷草转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、总蛋白（TP）、甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）含量均使用雷杜全自动生化分析仪Chemray 240测定。

1.5 数据统计与分析

所有试验数据经Excel 2010 初步进行统计后，采取SPSS 25.0 进行单因素方差分析，多重比较用Duncan's法，结果用“平均值±标准误”表示，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡生产性能的影响（见表2）

表2 溶菌酶对蛋鸡生产性能的影响

从表2 可见，与对照组相比，饲粮添加200、350、500 mg/kg 溶菌酶显著降低了蛋鸡平均日采食量（P＜0.05），而对产蛋率、平均日产蛋量和平均蛋重均无显著影响（P＞0.05），饲粮添加200 mg/kg 溶菌酶料蛋比降低了3.4%（P＞0.05），为各组最低值。

2.2 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡蛋品质的影响(见表3)

表3 溶菌酶对蛋鸡蛋品质的影响

从表3可见，与对照组相比，饲粮添加350 mg/kg溶菌酶，鸡蛋的哈氏单位在数值上有所提高，但差异不显著（P＞0.05），随着溶菌酶添加水平的提高，蛋黄胆固醇含量逐渐降低，饲粮添加500 mg/kg溶菌酶显著降低了蛋黄胆固醇的含量（P＜0.05）。饲粮添加200、350 mg/kg和500 mg/kg溶菌酶对蛋鸡的蛋形指数、蛋壳强度、蛋白高度、蛋黄颜色和蛋壳厚度均无显著影响（P＞0.05）。

2.3 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡血清生化指标的影响(见表4)

从表4 可见，与对照组相比，随着溶菌酶添加水平的提高，蛋鸡血清尿酸含量和总胆固醇含量逐渐降低，饲粮添加500 mg/kg 溶菌酶显著降低了血清尿酸和总胆固醇含量（P＜0.05）。饲粮添加200、350 mg/kg和500 mg/kg 溶菌酶对蛋鸡血清中的尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白、总蛋白和甘油三酯含量均无显著影响（P＞0.05）。

表4 溶菌酶对蛋鸡血清生化指标的影响

2.4 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡经济效益的影响(见表5)

由表5 可知，在试验期内，基础饲粮价格和鸡蛋价格大致为2.5 元/kg 和9 元/kg，该溶菌酶参考价格为100 元/kg，随着溶菌酶添加水平的提高，饲料的单价成本逐渐上升，200、350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶组饲料成本比对照组分别降低了0.270、0.207 元/只和0.063 元/只。与对照组相比较，200 mg/kg 溶菌酶组每只蛋鸡利润提高了0.207 元/只，350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶组利润分别减少了0.466 元/只和0.093 元/只。

表5 饲料成本与利润

3 讨论

3.1 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡生产性能的影响

在养殖蛋鸡的过程中，生产性能是评价经济效益的一个重要指标，也是评价饲料添加剂效果的重要指标。本试验表明，饲粮添加200、350 mg/kg和500 mg/kg溶菌酶对蛋鸡产蛋率、平均日产蛋量和平均蛋重均无显著影响，添加200 mg/kg 溶菌酶料蛋比降低了3.4%，这与前人研究结果不尽相同，杨荣芳[10]发现，饲粮中添加溶菌酶可显著提高蛋鸡产蛋率，Yun 等[12]和Gong 等[13]研究结果表明，肉鸡饲粮中添加溶菌酶对生长性能无显著影响，而目前有部分在肉鸡[14-15]、肉雏鸡[16]、肉鸭[17-18]、断奶仔猪[8，19]的报道均表明，饲粮中添加溶菌酶能提高畜禽的生长性能，这可能是与本试验发现添加溶菌酶以后显著降低了蛋鸡平均日采食量以及饲养时间过短有关。邵春荣等[20]在饲粮中添加4～100 mg/kg蛋清溶菌酶（1 200 U/mg）、张世卿等[21]在饲粮中添加300～600 mg/kg溶菌酶（1 000 U/mg）和Torki等[22]在饲粮中添加40 mg/kg蛋清溶菌酶（纯度≥90%）的结果均显示，添加溶菌酶降低了肉仔鸡的平均日采食量，这与本试验结果相似。但May 等[23]在流质饮食中添加溶菌酶（100 mg/l）饲喂断奶仔猪和Xu等[24]在饲粮中添加150 mg/kg和300 mg/kg溶菌酶（5 000 U/mg）饲喂哺乳母猪时发现，饲粮添加溶菌酶均可显著提高其平均日采食量，这与本研究结果不同。造成上述试验结果差异的原因也许是本试验使用的溶菌酶产品有发酵后的味道，添加到基础饲粮后其气味和味道改变，从而降低采食量，另外溶菌酶的加工工艺、纯度和酶活力不同，试验的畜禽、品种和日龄也不同。本试验表明，溶菌酶添加在蛋鸡饲粮中应保持在适量水平。

3.2 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡蛋品质的影响

蛋品质是评价鸡蛋优劣的一项重要指标，近年来，由于消费意识的提高，消费者更倾向购买蛋白浓厚、蛋黄颜色更深、蛋壳质量好的鸡蛋[25]。鸡蛋的蛋清品质一般用蛋白高度和哈氏单位来判定，其数值越高表示鸡蛋新鲜程度和口感越好[26]。本试验表明，饲粮添加350 mg/kg 溶菌酶饲喂蛋鸡，鸡蛋的哈氏单位在数值上有所提高。研究表明，溶菌酶的添加可显著提高十二指肠[14，16，27]和回肠[23]肠绒毛的高度，且能改善肠道菌群的组成[8]。黄群[28]研究发现，蛋清所含卵白蛋白约占新产鸡蛋总蛋白的54%，随着贮藏时间的推移卵白蛋白转变成S-卵白蛋白，而S-卵白蛋白含量与哈氏单位负相关。郑彩燕[29]研究表明，卵白蛋白与溶菌酶之间存在相互作用，这些结果可能与饲粮添加350 mg/kg 溶菌酶影响鸡蛋的蛋清品质有关。

蛋鸡主要合成胆固醇的器官是肝脏和卵巢，肝脏不仅担负机体主要胆固醇总合成量且合成速度快，血液总胆固醇也主要来源于此，大部分血液胆固醇随极低密度脂蛋白通过卵母细胞原生质膜受体介导和吞噬转入蛋黄，由此转化成95%蛋黄总胆固醇[30]。本研究表明，随着溶菌酶添加水平的提高，蛋黄胆固醇含量逐渐降低，饲粮添加500 mg/kg 溶菌酶显著降低蛋黄胆固醇含量，这与溶菌酶对血清总胆固醇含量的影响趋势一致，说明可能是因为溶菌酶有效地降低了血清胆固醇的含量，从而蛋黄中的胆固醇含量减少[31]。溶菌酶作为一种新型饲料添加剂，目前在蛋品质方面的研究较少。在本试验中，饲粮添加溶菌酶对蛋鸡的蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度和蛋黄颜色均无显著影响，这与杨荣芳[10]在蛋鸡上的试验结果一致。

3.3 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡血清生化指标的影响

通过对试验鸡只血清生化指标的测定，能反映其健康水平以及机体对营养物质的吸收程度和代谢状态[32]。尿酸不仅是畜禽机体代谢产物，还是核酸代谢和氨代谢的关键去路[33-34]。本试验表明，饲粮添加500 mg/kg 溶菌酶显著降低血清中尿酸含量，可能是由于溶菌酶的添加促进了蛋鸡对氮素的利用，加快了蛋白质的合成代谢。血清中总胆固醇和甘油三酯的水平与脂类物质的代谢相关，在产蛋高峰期蛋鸡中，脂类物质不仅为机体供能，还能为蛋黄的形成提供基础[35]。本试验结果表明，饲粮添加500 mg/kg 溶菌酶显著降低蛋鸡血清总胆固醇水平，可能是机体脂类物质的消化代谢加快，饲粮添加溶菌酶能促进蛋鸡机体脂类物质的代谢。另一方面，蛋鸡血液胆固醇大部分随极低密度脂蛋白转入蛋黄，且蛋鸡血清总胆固醇与蛋黄胆固醇含量的变化趋势一致，说明饲粮添加500 mg/kg 溶菌酶蛋黄胆固醇含量的降低可能是由于其血清胆固醇含量的降低。蛋鸡产蛋性能主要受下丘脑-垂体-卵巢轴调控，其中促性腺激素释放激素是重要因子，雌激素可直接和间接作用于促性腺激素释放激素神经元，从而诱导和调节其合成与分泌，影响产蛋性能[30]。本试验表明，随着溶菌酶添加水平的提高，血清总胆固醇含量和产蛋率变化趋势一致，说明血清胆固醇含量的降低可能与雌激素的水平有关，进而影响蛋鸡产蛋率，具体原因有待进一步分析。

血清总蛋白包括白蛋白和球蛋白，白蛋白在肝脏形成，而球蛋白是反映机体免疫能力的指标[36]。有研究表明，日粮中添加溶菌酶，能够提高肉仔鸡血清总蛋白[37]和白蛋白的含量[9,21]，可能是溶菌酶能加强畜禽机体蛋白质吸收和代谢能力[38]。本试验中，饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡血清的尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白、总蛋白和甘油三酯的含量无显著影响，可能是饲养周期短，溶菌酶中的有效成分发挥作用的时间更长，也可能和试验鸡的健康状况相关[39]。

3.4 饲粮中添加溶菌酶对蛋鸡经济效益的影响

经济效益直接反映了溶菌酶在蛋鸡生产中的应用效果。按照蛋鸡试验期市场价格，随着饲料成本的提高，与对照组相比较，200 mg/kg溶菌酶组每只蛋鸡利润提高了0.207 元/只，350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶组利润分别减少了0.466元/只和0.093元/只。由此可知，饲粮添加200 mg/kg溶菌酶经济效益最高。

4 结论

饲粮添加200、350 mg/kg 和500 mg/kg 溶菌酶可显著降低蛋鸡的平均日采食量，添加200 mg/kg 溶菌酶对产蛋率无显著影响，可降低料蛋比3.4%，提高了企业经济效益，添加500 mg/kg 溶菌酶可显著降低蛋黄胆固醇含量以及血清尿酸和总胆固醇含量。综上可见，200 mg/kg 溶菌酶在蛋鸡生产上的应用效果较好，推荐其为蛋鸡饲粮中的合适添加水平。