赵荣文,谭丽萍,刘同军

齐鲁工业大学(山东省科学院) 生物工程学院,济南 250353

溶菌酶(lysozyme)存在于卵清、唾液等生物分泌液中,能够催化细菌细胞壁肽聚糖 N-乙酰氨基葡糖和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键的水解。当与带负电荷的病毒蛋白相互结合时,溶菌酶能够与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐[1],这种复盐可使病毒失去活力。根据溶菌酶的结构和起源分为六大类[2],即c型溶菌酶；g型溶菌酶；i型溶菌酶；植物源溶菌酶；微生物源溶菌酶和噬菌体T4溶菌酶。溶菌酶的作用很广泛,越来越多人的研究人员开始关注溶菌酶,综述了溶菌酶常用的分离纯化方法以及其应用。

1 分离纯化方法

1.1 超滤法

超滤法是根据分子大小不同,使用不同大小孔径的膜进行分离纯化。陈姗姗[3]将毕赤氏基因重组酵母发酵液经过离心分离、超滤、膜分离、阳离子交换树脂吸附后,得到溶菌酶,经真空干燥后酶活可达 20 000 U/mg,通过这一系列步骤吸附后,大大提高了纯化效率。

1.2 亲和萃取法

在亲和萃取中,一种配基与另一种成相聚合物以共价相结合,由于这种配基与要提取的目的产品有较高的亲和力,这样体系双水相处理量大,而且亲和层析专一性高。有研究人员建立了一种利用辛巴蓝修饰的新型离子液体[C4MIM]3CB高效萃取鸡蛋清中溶菌酶的方法[4],并利用蛋白结构模型,计算其与[C4MIM]3CB的结合能,与其它已有的萃取分离方法相比,此法选择性高、操作简便、产品纯度高,为蛋清中溶菌酶的提取分离提供了一条新的、高效的途径。……