余连喜，黄建军，黄 真，梁雄燕

（1.江陵县畜牧兽医局，湖北 荆州 434100；2.长江大学动物科学学院，湖北 荆州 434025）

鸭坦布苏病毒病 （Duck Tembusuvirus，DTMUV）是一种由黄病毒科黄病毒属恩塔亚病毒群中的黄病毒引起的可以导致鸭共济失调、瘫痪、卵巢出血坏死及产蛋量骤降的传染性疾病[1-2]。2010年该病首次在我国的江苏、浙江和福建等地区的鸭群中暴发[3-5]，随后迅速蔓延到全国各地鸭群[6-9]，成为严重威胁我国养鸭业的重要疾病。

2019年秋，湖北荆州某蛋鸭养殖场的5000只3周龄雏鸭突然出现采食量下降、排绿色稀便，进而站立不稳、共济失调和迅速死亡。经过剖检和实验室诊断，确诊为鸭坦布苏病毒感染。用小柴胡散和扶正解毒散等药物治疗后鸭群病情迅速得到控制，并逐步恢复健康。

1 材料与方法

1.1 病例及主要试验材料

病鸭为湖北荆州某蛋鸭场的3周龄雏鸭。RNA提取试剂盒、反转录试剂盒和PCR Mix等相关试剂均购自于北京艾德莱生物科技有限公司。

1.2 临床诊断与剖检

询问病史，观察送检病鸭的临床症状，并按常规方法进行病理学剖检。

1.3 病原学检测

取具有明显病变的病鸭脑组织，用市售的RNA提取试剂盒提取RNA；以cDNA第一链合成试剂盒的随机引物为引物，合成cDNA第一链作为模板；参照文献[5，10-12]及genebank中的相关序列设计合成鸭坦布苏病毒特异性PCR检测引物，进行鸭坦布苏病毒核酸检测。RNA提取、cDNA第一链合成具体操作按照试剂盒说明书进行；PCR引物由武汉擎科创新生物科技公司合成，基因序列见表1。PCR体系采用25 μL体系，即：2× PCR Mix 12.5 μL，cDNA 模板 2 μL，10 pmol/μL的上下游引物DTMUV-iF、DTMUV-iR 各0.5 μL，去离子 H2O 9.5 μL。……