刘敏娟，邓月秀，马颖

（1.南方医科大学珠江医院妇产科，广州 510282；2.东莞市人民医院妇产科，广东 东莞 523000；3.桂林市妇幼保健院妇产科，广西 桂林 541001）

子宫内膜异位症（endometriosis，EM）是指子宫内膜出现在子宫腔外的组织并引起相应的症状，最常见部位为卵巢表面及盆腔腹膜。EM组织学上虽是良性疾病，却具有增生、浸润、转移及复发等恶性行为。EM好发于育龄期女性［1］，临床复发率高［2］，发病机制至今尚不明确［3］。

在恶性疾病的发生发展中，细胞侵袭能力增强及自噬能力降低占据着重要的地位［4］。子宫内膜细胞类似肿瘤细胞的行为是EM病灶形成的关键［5］。微小RNA（microRNA，miRNA）是由约22个核糖核酸组成的非编码RNA，能够与相应基因的mRNA结合，从而阻断蛋白编码基因的表达［6］，对细胞具有重要的调控作用［7］。研究［8］发现，miRNA与EM的发病有关，在EM和非EM患者子宫内膜组织中存在表达差异［9］。前期芯片测序发现，在EM患者子宫内膜组织中miR-34a-5p低表达，而miR-34a-5p与EM的关系鲜有报道，因此，本研究拟探讨miR-34a-5p在EM发病过程中是否存在调控作用。

1 材料与方法

1.1 材料

子宫内膜来源于南方医科大学珠江医院妇产科因子宫肌瘤等良性疾病及因EM行子宫切除的女性患者。所有患者术前3个月内未使用过外源性激素。本研究经南方医科大学珠江医院伦理委员会批准。详细记录患者的信息并签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 原代提取、分离及培养子宫内膜基质细胞（endometrial stromal cells，ESCs）和腺上皮细胞（endometrial epithelial cells，EECs）：无菌操作剖开离体子宫，刮取内膜组织，行原代细胞提取及分离。用PBS漂洗内膜组织3次，剪碎并加入3 mLⅠ型胶原酶（1 mg/mL，美国Gibco公司）37 ℃消化60 min，每15 min搅拌1次。……