氟伐他汀钠对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT/mTOR通路的影响
2020-09-21
(中国医科大学附属第一医院皮肤科,沈阳 110001)
皮肤鳞状细胞癌(cutaneous squamous cell carcinoma,CSCC)是世界上第二常见的皮肤癌,发病率不断升高[1]。近年来,我国CSCC的发病率也逐年升高,发病年龄呈现年轻化趋势。CSCC严重影响患者的生活质量,给患者带来了沉重的身心负担[2]。他汀类是治疗中老年人群高脂血症的常用药物。近年来,随着他汀类药物的广泛应用和对其作用机制的深入研究,其抗肿瘤的作用受到广泛关注[3-4]。在肺癌[5]、肝癌[6]、结直肠癌[7]、乳腺癌[8]等方面相关研究取得了一定进展,但他汀类药物在皮肤肿瘤方面的研究国内鲜有报道。本研究以培养的人CSCC SCL-1细胞为研究对象,观察氟伐他汀钠对SCL-1细胞的增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的分子机制。
1 材料与方法
1.1 主要材料和试剂
人CSCC细胞株 SCL-1由德国柏林自由大学本杰明·富兰克林医学中心惠赠。主要试剂包括氟伐他汀钠(上海源叶生物科技有限公司)、DMEM细胞培养液(美国Hyclone公司)、胎牛血清(美国Bioscience公司)、噻唑蓝(北京索莱宝公司)、二甲基亚砜(美国Sigma公司)、Annexin V/PI凋亡试剂盒(上海优宁维有限公司)、Trizol试剂(美国Invitrogen公司)、反转录试剂盒(日本Toyobo公司)、实时qPCR试剂盒(日本Toyobo公司)。
1.2 方法
1.2.1 氟伐他汀钠储存液及工作液配制:用DMSO将氟伐他汀钠充分溶解,配制成800 μmol/L浓度的母液(DMSO 终浓度≤0.01%),22 μm滤器过滤,4 ℃避光保存;用含10%胎牛血清的DMEM培养液稀释成含氟伐他汀钠10、20、50、100 μmol/L的工作液。
1.2.2 细胞培养:将 SCL-1细胞培养于含10% 胎牛血清的DMEM培养液中,置于37 ℃、5% CO2饱和湿度的培养箱中。观察培养基清亮,细胞呈贴壁生长,形态良好,细胞铺满瓶壁 70%~80%可以传代。……
