（中国医科大学附属第四医院眼科，中国医科大学眼科医院，辽宁省晶状体学重点实验室，沈阳 110005）

白内障作为全球首位致盲性眼病，严重影响患者的视觉质量与生活质量［1］。虽然手术是白内障目前最为有效的治疗方法，但存在手术禁忌证、并发症、后发性白内障等诸多问题。因此，非手术靶向治疗白内障的研究具有重要的社会效益和经济效益。

在种类众多的非编码RNA中，微小RNA（microRNA，miRNA）是一类长20～25个核苷酸的单链非编码RNA，通过直接与靶基因mRNA 3’非编码区结合的经典途径以及靶向调控其他非编码RNA的前体RNA等非经典途径，进行细胞内调控［2-3］。研究［4］表明，miR-125b与细胞凋亡密切相关，而晶状体上皮细胞凋亡是非先天性白内障形成的共同细胞学基础［5］。本研究组前期利用生物信息学软件预测到促凋亡蛋白BCL-2拮抗剂/杀手1（BCL-2 antagonist killer 1，BAK1）可能与miR-125b存在直接结合位点。BAK1属于促凋亡家族BCL-2，定位于线粒体的外膜上，是通过线粒体通路传递凋亡信号的必要组分［6-7］。因此，本研究拟观察miR-125b在紫外线诱导的小鼠白内障模型与人晶状体上皮细胞凋亡模型中的表达，及其对预测靶基因BAK1与人晶状体上皮细胞凋亡的调控作用。

1 材料与方法

1.1 材料

人晶状体上皮细胞系SRA01/04由中国医科大学附属第四医院眼科晶状体实验室提供。PrimerScriptTMRT 5 Enzyme Mix、SYBR premix Ex TaqⅡ（日本TaKaRa公司）；BAK1（D4E4）Rabbit mAb（美国CST公司）；山羊抗兔二抗（美国Proteintech公司）；miR-125b mimic、miR-125b mimic control；miR-125b inhibitor、miR-125b inhibitor control（广州锐博生物科技有限公司）；RNAiso（美国Invitrogen公司）；TUNEL细胞凋亡检测试剂盒（江苏凯基生物技术有限公司）；LipofectamineTMRNAiMAX（美国Invitrogen公司）。ABI 7500 real-time PCR系统（美国Applied Biosystems公司）；荧光显微镜（日本Olympus公司）；……