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新疆部分地区猪圆环病毒2型抗体检测与分析

2020-09-21张家瑞阿丽亚买买提依明屈勇刚谷思颖吴圆圆常军帅

中国猪业 2020年4期
关键词:免疫抗体圆环规模化

张家瑞 阿丽亚·买买提依明 屈勇刚* 谷思颖 魏 其 吴圆圆 李 静 常军帅 李 岩

(1石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832003;2新疆石河子市石河子镇农林牧办,新疆石河子 832000;3新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站,新疆乌鲁木齐 830063)

猪圆环病毒(PCV)于1974年首次被确定为猪肾细胞系PK-15的一种非致病性的病毒[1]。直至1991年,在加拿大首次从患断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)的猪中分离出一种PCV变异株,该变异株被确定为一种新的多因素综合征病原,并被命名为PCV-2。该变异株在系统发育和血清学上不同于PK-15细胞培养污染物,后者被称为PCV-1。PCV1和PCV2现被国际病毒分类委员会确认为圆环病毒属内的2个不同物种[2]。自2001年我国首次报道PCV-2感染后,该病在我国的流行呈逐年上升趋势[3]。由于该病除了自身带来的仔猪断奶后多系统衰弱综合征、皮炎和肾病综合征、增生性坏死间质肺炎和繁殖障碍等疾病外,还导致猪群产生严重的免疫抑制,给养猪业带来严重困扰和巨大经济损失[4]。疫苗免疫被认为是预防猪圆环病毒病的重要手段之一,抗体检测可以为控制当地疫病流行提供参考。使猪群长期保持较高的群体免疫水平,是规模化猪场有效防控猪圆环病毒病的有效措施之一[5]。为了解2019年新疆部分地区猪群的PCV-2的免疫抗体水平,本试验选择伊犁、昌吉、阿克苏、奎屯、石河子等5个地区的5个规模化猪场进行分析,以期在一定程度上为新疆地区养猪企业防控PCV2工作提供参考。

1 材料与方法

1.1 样品来源

血液样品采自新疆伊犁、昌吉、阿克苏、奎屯、石河子等5个地区的5个规模化猪场,共338份血清样品。其中,哺乳仔猪血清50份、保育猪血清64份、经产母猪血清129份、后备猪血清39份、育肥猪血清44份、种公猪血清12份。

1.2 诊断试剂盒和仪器

猪圆环病毒2-dCap-ELISA抗体检测试剂盒(北京金诺百泰生物技术有限公司,JN60315),自动酶标仪(美国BioTek公司)。

1.3 试验方法

1.3.1 采集样品

选择有代表性的规模化猪场,按照3~5 mL/头的标准,一次性从猪前腔静脉进行血液采集,经过30 min左右的室温静置,待血清析出后,逐管吸取1 mL血清于灭菌的1.5 mL EP管中,分组编码标记,以4 000 r/min的转速离心10 min,离心后直接进行ELISA检测,也可保存于-20℃条件下备用。

1.3.2 间接ELISA检测法

按照猪圆环病毒2-dCap-ELISA抗体检测试剂盒说明书进行操作,用酶标仪以450 nm波长测定各反应孔中的OD450值,据OD450值对抗体水平进行判定。

1.3.3 结果判定

试验有效判定为NCx(阴性对照的OD450值)>0.4,PCx(阳性对照的OD450值)<0.3;样品S/P=(样品 A450-NCxA450) /(PCxA450-NCxA450)。若被检样品的S/P<0.4,该样品为阴性;若被检样品的S/P≥0.4,该样品为阳性。

1.3.4 试验数据分析

使用SPSS 20、Excel等软件对试验数据进行统计分析。

2 结果与分析

2.1 不同地区规模化猪场猪圆环病毒2型抗体检测结果

5家规模化猪场共338份猪血清,猪圆环病毒2型抗体平均阳性率为70.71%,平均S/P值为1.69。5家规模化猪场(A、B、C、D、E)的抗体阳性率分别为48.57%、100.00%、58.49%、95.92%和39.29%。B场和D场的猪圆环病毒2型抗体阳性率均高于国家规定水平(>70%),且上述猪场的平均S/P值较大。A、C、E场的猪圆环病毒2型抗体平均阳性率(48.57%、58.49%和39.29%)低于国家规定水平。使用SPSS软件进行单因素方差分析显示B场和A、C、D、E 4个场猪圆环病毒2型抗体水平差异显著(<0.05);D场和A、B、C、E 4个场猪圆环病毒2型抗体水平差异显著(<0.05),结果见表1。

表1 新疆部分地区5个规模化猪场猪圆环病毒2型抗体检测结果

2.2 不同类别猪群的猪圆环病毒2型抗体检测结果

哺乳仔猪、保育猪、经产母猪、后备猪、育肥猪、种公猪的猪圆环病毒2型抗体平均阳性率分别为44.00%、26.56%、90.70%、92.31%、88.63%和66.67%。不同类别猪群之间的猪圆环病毒2型抗体水平存在较大差异。其中,经产母猪和后备猪的抗体阳性率达90%以上,保育猪的抗体阳性率最低为26.56%。哺乳仔猪、保育猪、后备猪、育肥猪、经产母猪、种公猪的猪圆环病毒2型抗体平均S/P值分别为0.46、0.62、2.02、1.94、1.65和0.74。结果见表2。

3 讨论

试验结果表明,2019年新疆伊犁、昌吉、阿克苏、奎屯、石河子5个地区的5个规模化猪场中只有2个猪场的猪圆环病毒2型抗体阳性率在国家规定水平(70%)以上,其余3个猪场的猪圆环病毒2型抗体阳性率均低于70%,造成这3个猪场抗体水平较低的原因有很多,如猪场饲养环境、免疫实施情况都会影响猪圆环病毒2型的免疫效果,应结合猪场的实际生产情况来调整免疫程序。相对于河南等地区免疫抗体的平均水平而言,本试验的猪场圆环病毒抗体水平总体水平较高[6]。但是,依然存在大量猪圆环病毒抗体水平低的猪场,情况不容乐观,应当引起相关猪场从业人员的高度重视,并鉴于该病严重的危害性,未达到国家规定水平的猪场应该加强控制力度,及时做好预防措施,对不合理的免疫程序进行调整[7]。

不同类别猪圆环病毒2型免疫抗体检测结果表明,不同类别猪群中猪圆环病毒2型免疫抗体水平存在差异,后备猪阳性率最高,为92.31%;保育猪的抗体水平最低,为26.56%,表明该类别的猪群免疫效果欠佳,需要调整为更合理的免疫程序。经产母猪、后备猪、育肥猪的阳性率分别是90.70%、92.31%和88.63%,原因可能是多次免疫的结果,也可能是野毒感染所致。结合刘鸽等[8]研究报道,建议哺乳期仔猪适时免疫猪圆环病毒2型疫苗,断奶后进行加强免疫,以确保仔猪进入保育阶段后可保持较高的猪圆环病毒2型抗体水平。

表2 不同类别猪群猪圆环病毒2型免疫抗体检测结果

对于PCV2这类免疫抑制性疾病,目前尚无特效药物,规模化猪场在防控中,只有采取综合防控措施(如加强野毒感染的检测、使用有效的疫苗、疫苗免疫水平的监测等),才能取得良好控制疫病的效果[9]。免疫抗体的监测在调整完善免疫程序中起着关键作用[10]。建议根据抗体水平波动情况对免疫接种方案及时做出正确判断,并采取有效的措施来提高疫苗免疫效果,及时做好疫苗补免与淘汰工作,做到防微杜渐,以确保新疆地区的生猪养殖事业长久稳定发展。

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