（中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛 266032）

鹦鹉热是由鹦鹉热衣原体（Chlamydia psittaci）感染所引起的一种人兽共患病。鹦鹉热衣原体是一种专性细胞内寄生的革兰阴性菌，其发育形态有两种：一种是能二分裂增殖的网状小体，另一种是有感染能力的原生小体[1]。目前已知鹦鹉热衣原体有9 个血清型，分别为A、B、C、D、E、F、E/B、WC 和M56 型[2]。它是一种多宿主性病原微生物，能通过呼吸道或直接接触传播，可感染多种鸟类和人类。目前鹦鹉热广泛分布于世界各地，中国、美国、巴西、日本和比利时等国家都有鸟类感染鹦鹉热衣原体的报道[3-8]。

近年来鹦鹉热衣原体作为鸟类衣原体病和人类衣原体病的病原越来越受到重视，研究热点多集中在如何防止家禽感染以及感染后的治疗措施方面。对于该病的诊断大多集中在细胞培养、PCR或基因芯片等[9]，而受病原分离培养和实验室条件等的限制，很多方法在实际应用中不能较好发挥作用。本研究基于环介导等温扩增的原理，针对鹦鹉热衣原体23SRNA 基因序列设计通用引物，建立一种恒温荧光扩增鹦鹉热衣原体的方法。该方法可用恒温荧光仪直接检测荧光信号强度，从而减少了肉眼判读结果的误差，既增强了准确性，也避免了开盖污染产生假阳性。本方法的建立为鹦鹉热衣原体病的快速诊断、实验室鉴定和疫情监测提供了技术支撑。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 质粒和核酸DNA 根据NCBI 中的鹦鹉热衣原体23SRNA 基因序列，运用DNAstar 软件进行同源性分析和BLAST 序列分析，筛选出23SRNA 基因高度保守序列，以筛选获得的高度保守序列作为检测目的基因片段，合成阳性质粒，质粒大小为2 781 bp，质量浓度为32.55 ng/μL。……