ELISA 法检测家禽活疫苗中禽白血病病毒污染的测量不确定度评估
2020-09-07
中国动物检疫 2020年9期
(青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛 266114)
禽白血病是由禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)引起的一种以免疫抑制、生长抑制和髓细胞癌变为特点的传染性致骨髓细胞瘤疾病或成髓性白血病[1]。家禽活疫苗中ALV 的污染和传播是引起禽白血病流行的重要原因。因此,家禽活疫苗中ALV 污染检测对提高生物制品安全性非常重要[2]。
酶联免疫吸附(ELISA)法是具有特异性强、灵敏度高、操作简单、所需设备较少、试剂稳定等优点,成为近年来病毒检测方法中发展最快,应用最广的一种方法。用ELISA 法测定家禽活疫苗中ALV 污染状况,其测量结果的可信度很大程度上取决于不确定度的大小。测量不确定度是与测量结果相关联的参数,表征合理赋予被测量值的分散性。测量不确定度用标准偏差表示时,称为标准不确定度,如用说明了置信水准区间的半宽度表示方法,则为扩展不确定度。在家禽活疫苗的ALV 污染检测结果中引入测量不确定度[3-4],目的在于分析不确定度的来源并对其量化,有助于检测人员关注检测关键环节,提高检测结果的准确性,并为兽医实验室开展相关工作提供借鉴。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品 鸡新城疫活疫苗(La Sota 株)、鸡传染性支气管炎活疫苗(H120 株)、鸡传染性法氏囊活疫苗(B87 株)和“鸡新城疫、传染性支气管炎”二联活疫苗(La Sota 株+QXL87 株)。
1.1.2 试剂 ALV ELISA 检测试剂盒、鸡新城疫病毒阳性血清、鸡传染性法氏囊病毒阳性血清,购自中国兽医药品监察所。
1.1.3 仪器 酶标仪(型号SUNRISE),瑞士Tecan 公司产品;10~100 μL 单道移液器、30~300 μL多道移液器,Eppendorf 公司产品;……
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