曹小燕　路宏朝　张强　任传清　刘建利

摘 要 以丹皮酚和糠醛为原料，黄酮醇为荧光团，丙烯酸酯为识别基团，设计并合成了一种黄酮醇类半胱氨酸荧光探针2-（2-呋喃基）-7-甲氧基色酮-3-丙烯酸酯（HFAC），采用核磁共振（1H NMR、13C NMR ）和高分辨质谱（HRMS-ESI）确证其结构。吸收光谱和发射光谱结果表明，探针HFAC对半胱氨酸（Cys）具有高效的检测识别能力。同时，荧光实验证实了探针HFAC是一种“关-开”型荧光探针，525 nm处的荧光强度与Cys浓度在20～400 μmol/L范围内呈良好的线性关系，线性方程为y=0.4608x + 3.994（R²=0.9987），检出限为379 nmol/L，并在365 nm紫外光下发出亮绿色荧光。A549细胞荧光成像实验表明，探针HFAC具有低毒性、良好的细胞膜通透性和生物相容性，具有快速检测细胞内/外源生物硫醇Cys的能力。

关键词 黄酮醇; 半胱氨酸; 荧光探针; 细胞成像

1 引 言

细胞内生物硫醇主要包括半胱氨酸（Cys）、高半胱氨酸（Hcy）和谷胱甘肽（GSH）等，在维持机体的正常生理活动中发挥了重要作用，如调解生物体内的氧化还原平衡、维持生物体内正常生命活动和预防疾病等[1～5]。生物硫醇浓度异常，易引起一系列疾病，如心脏病、肝损伤、癌症、骨质疏松症、肠道炎症及心血管疾病等[6，7]。Cys是细胞内含量丰富的含有巯基的氨基酸（30～200 μmol/L），在蛋白质的合成、解毒、代谢和翻译后修饰等方面发挥重要作用[8]; 若机体内Cys缺失，易引发多种疾病，如生长发育缓慢、皮肤损伤、身体虚弱、肝损伤、嗜睡、头发褪色、癌症等疾病[9]。因此，在生理条件下，对Cys进行实时、高效、准确的定量检测，在疾病早期诊断和生化研究中具有重要意义。……