洪开文，宋 伦，郑 重,陈 懿，卢海莎

(1 安顺职业技术学院应用医药系，贵州 安顺 561000；2 黔中民族药(苗药)资源开发与产业化协同创新中心，贵州 安顺 561000)

黔中屯堡地区多年来使用含有中大黄、眼子菜、刺梨根、龙牙草等4味药材组成酒剂处方，经过实践证明，该处方具有清热通便、止血等功效，在黔中屯堡地区用于酒泡服后治疗便秘、痔疮等疗效显著。方中大黄为主要药材之一，具有明显泻下作用。研究表明，以大黄素、大黄酚等为代表的游离蒽醌类化合物是大黄的主要有效成分[1]。本研究通过HPLC法测定处方中大黄素和大黄酚含量，作为内在质量控制指标之一。

1 仪器与试剂

1.1 仪 器

LC-20AT高效液相色谱仪，日本津岛；Elmasonic Easy30H超声清洗机；PTX-FA110S电子天平；艾柯exceed-c实验室专用超纯水机。

1.2 试 剂

大黄素对照品(批号 110756-200111，供含量测定用)、大黄酚对照品(批号110796-201318，供含量测定用)，甲醇为色谱纯，磷酸为分析纯，提取用的甲醇、二氯甲烷等为分析纯，水为实验室自制超纯水。

2 实验方法

2.1 色谱条件[2]

固定相：依立特C18柱(5 μm，4.6 mm×250 mm)；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15，V/V)；检测波长为240 nm；流速：1 mL/min；柱温：30 ℃；理论塔板数按大黄素峰计算应不低于3500。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备

精密称取干燥的大黄素对照品、大黄酚对照品适量，加甲醇溶液溶解，分别制成每1 mL含大黄素10.16 μg、大黄酚28.38 μg的混合溶液。

2.2.2 样品溶液的制备[3-6]

取处方当量药材粉末(过四号筛)约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，密塞，称定重量，加热回流45 min，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤……