郭新荣 李婉露 刘 宁 马小卫

(陕西中医药大学针灸推拿学院，陕西 咸阳 712046)

颅脑损伤(traumatic brain injury，TBI)临床常表现为意识丧失、失语、头痛、眩晕及认知障碍(cognitive dysfunction，CD)等[1-2]，CD是多数TBI患者伴有的最持久、最严重的症状之一，特别是学习新知识能力减退，给个人、家庭和社会带来沉重负担[3]。临床实践表明电针治疗TBI后CD疗效肯定[4-5]。为进一步探讨其作用机制，本实验研究电针对TBI后CD大鼠海马磷酸化认知缺陷突触相关蛋白(SynGAP)的调控作用，以期为电针治疗TBI后CD的临床应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 SD雄性大鼠80只，体质量220～240 g，购自西安交通大学医学院实验动物中心，动物合格证号：SCXK(陕)2012-003号。饲养环境：温度18～24 ℃,湿度60%～70%，自由饮水，自然光照。

1.1.2 主要试剂 4%多聚甲醛溶液、含戊二醛的4%多聚甲醛溶液(美国Sigma公司)；2.5%戊二醛溶液(湖北新景新材料有限公司)；兔抗SynGAP一抗(武汉博士德生物工程有限公司)；即用型链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(SABC)免疫组化染色试剂盒(兔源二抗)(武汉博士德生物工程有限公司)；二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)；2%戊巴比妥钠溶液[默克化工技术(上海)有限公司]；硫酸庆大霉素注射液(国药集团容生制药有限公司，国药准字H41024153)；注射用氨苄西林钠[石药集团中诺药业(石家庄)有限公司，国药准字H13021267]。

1.1.3 主要仪器 脑立体定位仪(ST-3ND型，成都仪器厂)；电子颅脑损伤仪(eCCI-6.3型，美国VCU大学)；自动酶标仪(Spectra M5型，美国Molecular Devices公司)；MORRIS水迷宫视频分析系统(RD1101-MWM-G型，上海移数信息科技有限公司)；超声波细胞粉碎仪(JY92-Ⅱ型，宁波新艺超声设备有限公司)；……