熊 峻，佘金明，刘宏伟*，王 虹，龚力民

(1.常德职业技术学院，湖南 常德 415000；2.湖南中医药大学 药学院，湖南 长沙 410000)

天胡荽为伞形科天胡荽属植物天胡荽HydrocotylesibthorpioidesLam的全草，具有清热利湿、解毒消肿等功效，主要用于治疗黄疸、痢疾、水肿、淋症、目翳、喉肿、痈肿疮毒、带状疱疹、跌打损伤等[1]。目前对天胡荽化学成分挥发油、黄酮类等物质的提取和含量测定较多[2-8]，而对于不同采收时间天胡荽挥发油的组分分析尚未见报道。为了更好地开发湖南的天胡荽资源，本实验采用水蒸气蒸馏法提取不同采收时间天胡荽的挥发油，通过GC-MS对其成分进行分析鉴定，定量定性分析不同采收时间天胡荽挥发油的含量及组分变化，探讨天胡荽挥发油组分的季节性差异，以期为湖南天胡荽资源的进一步开发利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 药材、试剂与仪器

实验用天胡荽样品共6批分别于2019年3月12日(编号20190312)、4月15日(编号20190415)、5月14日(编号20190514)、6月12日(编号20190612)、7月11日(编号20190711)、8月10日(编号20190810)采自湖南省常德市穿紫河沿岸，经常德职业技术学院药学系佘金明教授鉴定无误。

气质联用仪为GC-MS QP2010(日本岛津公司)，弹性石英毛细管柱DB-5MS(30 m×0.25 mm×0.25 μm，日本岛津公司)，GC-MS Solution色谱工作站(日本岛津公司)。万分之一电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)，乙酸乙酯(湖南汇虹试剂有限公司)，无水硫酸钠(湖南汇虹试剂有限公司)，水蒸气蒸馏简易装置。

1.2 实验方法

1.2.1 挥发油提取 将6批不同时间采收的天胡荽半阴干品剪碎，各精密称取50 g，分别置于1 000 mL圆底烧瓶中，加入500 mL蒸馏水，上接挥发油提取器和冷凝管，回流提取8 h。用适量乙酸乙酯洗脱挥发油，充分摇匀静止后，取油层，用无水硫酸钠干燥，用乙酸乙酯定容至4 mL，用0.45 μm微孔滤膜过滤，得供试品。

1.2.2 气相色谱-质谱条件 设置程序，程序升温：起始温度40 ℃，保持6 min，以10 ℃/min升温到150 ℃保持1 min，再以5 ℃/min升温到240 ℃保持11 min至完成分析；气化室温度为250 ℃；载气为氦气，流速为1.0 mL/min；进样量为1 μL，分流比为15∶1；电离方式为EI源，70 eV；离子源温度为200 ℃；溶剂延迟3 min；质量扫描范围35～500 amu；SCAN扫描。质谱检索标准库：美国NIST质谱数据库，人工图谱解析，采用峰面积归一化法定量分析各组分相对百分含量。

2 结果与分析

2.1 挥发油总量比较

按“1.2.1”所述方法分别提取6批天胡荽的挥发油，所得的挥发油含量均约为0.15 mL，表明不同时间采收的天胡荽挥发油含量无显著差异。

2.2 不同采收期挥发油组分分析

注：1.醋酸正丙酯；2.榄香烯；3.(E)-β-法呢烯；4.氧化石竹烯；5.α-红没药醇；6.新植二烯；7.n-棕榈酸；8.镰叶芹醇；9.叶绿醇。

按“1.2.2”所述方法分别获得6批天胡荽挥发油成分总离子流色谱，如图1所示。对色谱图中匹配度>85%的成分进行分析鉴定，共鉴定出60个化合物。3月、4月、5月、6月、7月、8月样品中鉴定出的挥发油成分分别为27个、29个、22个、29个、29个和27个。见表1。

表1 不同采摘时间天胡荽挥发油成分和相对面积

续表1

结果表明，3-8月样品中共有挥发油成分9个，分别为醋酸正丙酯、榄香烯、(E)-β-法呢烯、氧化石竹烯、α-红没药醇、新植二烯、n-棕榈酸、镰叶芹醇、叶绿醇。这9个共有挥发油成分占3-8月样品的总比率分别为83.41%、85.10%、95.26%、92.98%、91.88%、88.09%。由此可见，6批不同采摘时间天胡荽共有挥发油成分总含量大致相同，其余含量较低成分有所差异。镰叶芹醇是含量最高的成分，在3-8月的样品中占挥发油成分总量依次为44.68%、68.46%、85.19%、83.40%、84.58%、81.08%，其中5-8月相对稳定；叶绿醇的相对含量在5月最高；β-法呢烯的相对含量在3月高达30.82%，而其他月份均不超过1%；另外6种共有成分相对含量均较低。主成分镰叶芹醇具有镇静、镇痛、抗癌、抗细菌、抗真菌和神经细胞保护等药理作用[9]，由此推断，不同采摘时间天胡荽的功效会有所不同。

2.3 不同采收期挥发油成分种类分析比较

对3-8月样品中的挥发油成分进行分类，见表2。结果表明3-8月样品中均含有脂肪酸、酯类、烯烃、醇类、醚类，其中醇类是3-8月样品中相对峰面积最大的成分(3月至8月样品中醇类的相对峰面积依次是 50.26%、74.34%、91.80%、88.08%、89.18%、85.00%)，烯烃次之(3-8月样品中烯烃的相对峰面积依次是40.18%、19.43%、1.99%、3.95%、4.60%、8.80%)，同时烯烃也是所含成分数量最多的一类，这与之前已报道的黔产天胡荽挥发油种类规律较一致[2]。这两类主要挥发油成分占3-8月样品相对峰面积依次为90.44%、93.77%、93.79%、92.04%、93.78%、93.80%。对不同采摘时间天胡荽中的挥发油成分进行分类可见，两类主要挥发油成分醇类和烯烃占3月至8月样品的相对峰面积均在90%～94%之间，较为稳定。

表2 不同采摘时间天胡荽挥发油成分种类和相对峰面积

3 讨论

不同采摘时间的天胡荽样本挥发油成分含量表现出一定差异性。天胡荽中含量最大的挥发油成分为镰叶芹醇，其含量由3月的44.68%上升为5月的85.19%，5-8月含量没有明显的时间性变化规律，但其含量变化在整个挥发油组分中已经趋于相对稳定，这与天胡荽的花、果期处于4-9月较为一致。

天胡荽挥发油成分以醇类和烯烃类为主，醇类含量由3月50.26%升至5月91.80%，6月、7月、8月依次有少许下降，烯烃含量由3月的40.18%降至5月的1.99%，6月、7月、8月又依次有少许上升，而3-8月这两类成分的总量稳定集中在90%～94%之间，说明不同采摘时间天胡荽挥发油成分的变化主要是醇类和烯烃类组分的变化。

天胡荽挥发油成分随采摘时间的变化对于评价天胡荽挥发油整体功效及验证其镇静、镇痛、抗癌、抗细菌、抗真菌和神经细胞保护等可能具有重要的研究意义。因此，可根据天胡荽挥发油的组分变化，对其药理药用价值进行进一步开发利用。