（山东畜牧兽医职业学院，山东潍坊 261061）

奶牛乳腺炎是奶牛最常发生的疾病，给世界各国奶牛产业造成巨大损失。据报道[1]，引起奶牛乳腺炎的病原微生物有150 多种，其中以细菌为主。而细菌感染情况与地域、饲养环境及使用药物等因素有关。因此，准确掌握引发本地区奶牛乳腺炎主要致病菌的种类和耐药性，避免盲目用药，是防治该地区奶牛乳腺炎的关键。

近年来，东营市奶牛产业发展迅速，但尚未有该地区奶牛乳腺炎病原学的调查和研究报道。因此，本研究对东营市奶牛乳腺炎主要致病菌进行分离鉴定及耐药性检测，以期对该地区选择有效药物防治奶牛乳腺炎提供参考。

1 试验材料

1.1 培养基

普通营养琼脂、改良艾德华琼脂、S-S 琼脂、麦康凯琼脂等培养基和生化鉴定微量发酵管，杭州滨和微生物试剂有限公司生产。营养肉汤、绵羊血琼脂培养基，按照陈天寿[2]提供的方法自行制备。

1.2 药敏纸片

制备头孢洛宁、头孢噻呋、头孢喹肟、苄星氯唑西林、庆大霉素、利福昔明等12 种药敏纸片的原材料，参照胡桂学[3]、丁伯良等[4]提供的方法自行制备。金黄色葡萄球菌（ATCC25923）和大肠杆菌（ATCC25922），均购自杭州滨和微生物试剂有限公司。

1.3 诊断试剂

LMT 乳腺炎诊断试剂，购自兰州畜牧与兽药研究所。

2 试验方法

2.1 奶样采集

从东营市的5 个奶牛场，参照李晓楠等[5]的方法，选取临床型乳腺炎和隐性型乳腺炎各50 例，在临床型乳腺炎乳区和隐性型乳腺炎阳性乳区，参照阮智杨等[6]的方法，无菌操作，采集奶样100 份，标记后置4 ℃冰箱冷藏保存。……