李 媛，李 娜，付文静，舒春梅，张玉杰，马 冲

黑色素瘤是一种由神经嵴衍生的黑色素细胞引发的恶性上皮性肿瘤,多发于皮肤或黏膜，是最常见的皮肤致死性肿瘤之一[1]。黑色素瘤极具侵袭性，对常规放疗和化疗反应较差，导致患者预后不良[2]。虽然已开发出多种靶向药物，但这些药物对黑色素瘤患者的临床疗效改善有限[3]。因此，寻找新的有效的治疗方法是提高患者生存率及降低发病率的重要方式。藏红花素(crocin) 是从鸢尾科番红花属球根类草本植物藏红花(CrocussativusI) 中提取的一种水溶性类胡萝卜素。藏红花素对人类肿瘤具有抗肿瘤活性、明显抑制癌细胞的生长，但对正常细胞没有影响[4]。该研究拟通过以黑色素瘤A375细胞裸鼠模型，探索藏红花素对A375黑色素瘤生长、运动及对肿瘤引起的多器官病变是否存在AKT和STAT3信号通路的参与，以及该通路相关蛋白的表达情况，从而确定新的治疗靶点，以期为藏红花素应用于黑色素瘤的治疗提供理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物选用45只SPF级健康成年雄性Sprague Dawleg(SD)小鼠，鼠龄为5～8个月，体质量180～260 g，饲养于温度23.5～25.6 ℃，相对湿度69%～84%的环境中，饲料与饮水自由摄取。

1.2 主要试剂与仪器藏红花素(美国Sigma公司)；人源性黑色素瘤细胞系A375(中国科学院上海细胞生物学研究所)；10%胎牛血清、无血清细胞冻存(dulbecco modified eagle medium，DMEM) 培养基、0.25%胰蛋白酶(美国Gibco公司)；二喹啉甲酸(bicinchoninic acid，BCA) 蛋白定量试剂盒(美国PIERCE公司)；MatrigelTM底膜基质(美国BD公司)。Ki-67、Capase-3、VEGE、Vimetin、E-cadherin、N-cadherin、Fibronectin、AKT、p-AKT、STAT3和p-STAT3抗体(美国NEB公司)；HRP标记的山羊抗大鼠二抗(美国Santa Cruz公司)；Olympus BX51光学显微镜(日本奥林巴斯光学有限公司)；……