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干扰AKAP12调控G1/S期促进乳腺癌MCF-7细胞增殖

2020-08-06梁瑞鹏陆春花于恒恒袁顺杰刘维薇

安徽医科大学学报 2020年7期
关键词:乳腺癌检测研究

梁瑞鹏,程 倩,陆春花,李 可,于恒恒,徐 彬,袁顺杰,刘维薇,林 清

乳腺癌是女性最常诊断的恶性肿瘤之一,近年来无论是发病率还是致死率均高居首位[1]。众所周知,乳腺癌是一组高度异质性疾病,雌激素受体(estrogen receptor;ER)阳性乳腺癌约占所有乳腺癌70%,在乳腺癌患者占有较大比例。A型激酶锚定蛋白12(A kinase-anchored protein 12;AKAP12)是胞内大分子支架蛋白与维持正常组织结构功能完整[2]及肿瘤细胞增殖、侵袭转移[3]等过程密切相关。AKAP12最早被用来评价重症肌无力预后的抗原,随后研究[4]发现在src基因、ras基因等原癌基因转化的成纤维细胞中AKAP12表达明显下调,文献[5]报道,与正常组织相比,AKAP12在多种肿瘤中表达下调,如实体肿瘤肺癌、结直肠癌[3]、肝癌[6],血液肿瘤如幼年髓单核细胞白血病[7],在肿瘤细胞重新表达AKAP12抑制肿瘤细胞增殖、迁移侵袭,而干扰AKAP12则增加肿瘤细胞增殖、迁移侵袭能力,因此AKAP12被认为是潜在的抑癌基因。但AKAP12与乳腺癌生物学功能是否有关尚未阐明,AKAP12是否参与乳腺癌的发生发展有待于研究。该研究通过干扰ER阳性乳腺癌MCF-7细胞中AKAP12表达来观察其对ER阳性MCF-7细胞增殖、周期机制的影响,初步探讨AKAP12在ER阳性乳腺癌发生发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 主要材料人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468和SK-BR-3以及乳腺正常上皮细胞MCF-10A均购自中国科学院上海细胞库;特异性干扰AKAP12基因的慢病毒和阴性对照慢病毒购自吉凯公司;DMEM培养基购自Gibco公司;胎牛血清购自hyclone公司;CCK-8试剂购自上海诺维赞生物科技公司;RIPA裂解液(强)、蛋白酶抑制剂PMSF购自江苏碧云天生物技术研究所;……

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