刘小艳,黄 浩,鲁梅芳,李 洪,吕正梅,蔡春林

融合蛋白是由联合基因产生的连读转录蛋白[1]。目前，仅有34个融合蛋白被描述[2]。近年来，已在不同的癌症中检测到了此类融合蛋白，并被推测可能具有致病性[3]。热休克蛋白家族成员1(heat shock protein family member 1, HSPE1)是热休克蛋白家族的一员，可以与线粒体热休克蛋白60(heat shock proteinfamily D member1，HSPD1)“共伴侣”帮助其他蛋白质折叠并驱动有缺陷的蛋白质降解[4]。鼠类人α-趋化因子类似物(murine human-like alpha-chemokine analog one binder family member 4，MOB4)为MOB家族成员，可以结合蛋白激酶，在细胞内发挥辅助信号转导的作用[5]。HSPE1-MOB4融合蛋白是由相邻基因HSPE1和MOB4连读形成，在正常组织中广泛表达。目前，NCBI数据库(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/553164)收录的融合蛋白HSPE1-MOB4的信息中仅见分子量大小(约30 ku)及所对应的一条mRNA序列。虽有报道在甲状腺滤泡癌的蛋白组学分析及精神病基因组学联盟的基因集中提及此融合蛋白[6-7]，但均未展开对此融合蛋白的研究。由此该研究对HSPE1-MOB4的表达及其融合亚型进行初步探索。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞系 本实验所用细胞系：人正常胃黏膜上皮细胞GES-1、人正常肝细胞LO-2、人正常卵巢上皮细胞IOSE-80、人正常肺上皮细胞HFL-1(CBP60185)、人胃癌细胞MGC803、人肝癌细胞Hep3B(CBP60197、人卵巢癌上皮细胞OV90、人肺癌上皮细胞A549(CBP60084)均购自南京科佰生物科技有限公司。

1.1.2试剂 DMEM高糖培养基、胎牛血清(以色列BI公司)；青霉素/链霉素(上海碧云天生物技术有限公司)；细胞总RNA提取试剂盒(北京天根生化科技有限公司)；反转录试剂盒(日本TaKaRa公司)；PCR Master mix(南京诺唯赞生物科技有限公司)；DNA琼脂糖(西班牙BIOWESTE公司)；DNA Marker(广东东盛生物科技有限公司)；DNA回收试剂盒(安徽朵能生物科技有限公司)；……