游 莉 黄 薇 池祥波 陈耀凯 欧阳净 王 丽 荣 黎

(西南大学医院，重庆 400715)

作为发病率最高的消化道恶性肿瘤，胃癌的药物疗效不容乐观[1,2]。中药在肿瘤防治中具有诸多优势。红景天甙为红景天提取物，在白血病、乳腺癌等肿瘤中功效显著，极具开发前景，课题组前期功能实验证明其能抑制胃癌细胞增殖，促进凋亡[3-5]。PI3K/AkT是调控细胞凋亡的重要通路，与肿瘤发生发展密切相关，以关键分子为靶点的肿瘤药物开发逐渐深入[6，7]。本研究以PI3K/AKT信号为靶点，研究其在红景天甙促进胃癌细胞凋亡中的作用，为深入探究红景天甙在胃癌中的治疗效果及相关机制提供依据。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1细胞株 人胃癌细胞株AGS由重庆医科大学基础医学院馈赠。

1.1.2试剂 红景天苷(南京格尔狄生物科技有限公司)，1640培养基(美国Hyclone公司),胎牛血清(美国Gibco公司),IGF-1(美国Sigma Aldrich公司)，CCK-8试剂盒(日本Dojindo公司)，Hoechst33342、AV/PI细胞凋亡检测试剂盒(北京碧云天生物公司)，Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase-3、cleaved、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT抗体(上海abwaystechnology公司)

1.2方法

1.2.1细胞培养及分组 AGS细胞培养于含10%胎牛血清的1640培养基，取对数生长期细胞用于实验。不含红景天甙的1640培养基作为对照组，红景天甙处理的胃癌细胞作为实验组，10 μmol/L IGF-1预处理30 min的实验组作为干预组。

1.2.2CCK-8法检测红景天甙对AGS细胞增殖的影响 80%～90%生长密度且状态良好的对数生长期胃癌细胞以5×104个/孔接种于96孔板，加入经PBS溶解的不同浓度的红景天甙，每组设 3个复孔。37℃培养48 h，1 700 r/min离心，弃上清，加入10 μl CCK-8试剂避光孵育1 h，酶标仪进行双波长(490 nm 和630 nm)检测 OD值，计算IC50并绘图。抑制率(%)=(1-OD实验组/OD对照组) ×100%。……